[发明专利]在琼脂培养基上快速高效获得银耳菌子实体的方法

权利要求书

1.在琼脂培养基上快速高效获得银耳菌子实体的方法，其特征在于，方法如下：

（1）制备银耳菌菌丝诱导培养基：银耳菌菌丝诱导培养基Y1配方为：蛋白胨4.0-5.0g/L，酵母粉1.0-2.0 g/L，硫酸铵1.2-1.5 g/L，过磷酸钙1.0-1.3 g/L，琼脂25-30 g/L，剩余用香灰菌滤液定容至1L；所述香灰菌滤液为银耳出菇包或香灰菌菌包的培养料基质按干料120-150g放入1L水中，煮沸浸提后经过滤获得，或者香灰菌的液体培养液经过滤获得；

（2）进行银耳菌菌丝的诱导培养：将银耳菌可亲和混合芽孢接种于所述银耳菌菌丝诱导培养基Y1，置于24±1℃培养6-10天，获得银耳菌菌丝；所述银耳菌可亲和混合芽孢是将银耳担孢子在PDA培养基上萌发获得，或通过银耳菌组织萌发获得；

（3）制备银耳菌子实体诱导培养基：银耳菌子实体诱导培养基Y2配方为：麦芽糖10-15g/L，葡萄糖10-15g/L，蔗糖10-15g/L，酵母粉0.8-1.2g/L，蛋白胨4-6g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸镁1g/L，1/2MS 0.8-1g/L，小麦全粉4-6g/L，6-BA 0.8-1.2mg/L，2,4-D 0.4-0.6mg/L，NAA0.4-0.6mg/L，琼脂25-30g/L，剩余用香灰菌滤液定容至1L；

（4）进行银耳菌子实体的诱导培养：将步骤（2）获得的银耳菌菌丝接种于所述银耳菌子实体诱导培养基Y2，置于24±1℃培养10-15天，即获得银耳菌子实体。

2.如权利要求1所述的在琼脂培养基上快速高效获得银耳菌子实体的方法，其特征在于，所述银耳菌菌丝诱导培养基Y1的制作方法如下：

（1）称取银耳出菇包或香灰菌菌包的培养基质120-150g打碎，放入水中，煮沸浸提，过滤，取滤液1 L；或将香灰菌液体培养液过滤，取滤液1L；

（2）称取蛋白胨4.0-5.0g，酵母粉1.0-2.0g，硫酸铵1.2-1.5g，过磷酸钙1.0-1.3g，琼脂25-30 g，加入到上述滤液中融化后装瓶进行灭菌，得到培养基；

（3）将上述培养基无菌操作分装至培养皿中，冷却即可。

3.如权利要求1或2所述的在琼脂培养基上快速高效获得银耳菌子实体的方法，其特征在于，所述银耳菌子实体诱导培养基Y2的配制如下：

（1）称取0.01g水溶性NAA，用水加热溶解，再用水定容至10mL，配成1mg/mL的NAA母液备用；

（2）称取0.01g 6-BA，用稀盐酸加热溶解，再用水定容至10mL，配成1mg/mL的6-BA母液备用；

（3）称取0.01g 2,4-D，用乙醇加热溶解，再用水定容至10mL，配成1mg/mL的2,4-D母液备用；

（4）称取麦芽糖10-15g，葡萄糖10-15g，蔗糖10-15g，酵母粉0.8-1.2g，蛋白胨4-6g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁1g，1/2MS 0.8-1g，小麦全粉4-6g，琼脂25-30g，溶于800mL香灰菌滤液中，再分别加入上述1mg/mL 的NAA母液400-600μL，1mg/mL的6-BA母液800-1200μL，1mg/mL的2,4-D母液400-600μL，最后再用香灰菌滤液定容至1L；

（5）将上述定容后的溶液分装至350mL广口组培瓶，每瓶分装50mL培养基，灭菌、冷却备用；或将上述定容后的溶液灭菌后分装于培养皿中，冷却备用。