[发明专利]猪笼草组培快速育苗方法及其应用

权利要求书

1.猪笼草组培快速育苗方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）外植体清洁：选择猪笼草幼嫩茎段，剪去叶片，置于饱和肥皂水溶液中涮洗8～10min，后用自来水洗净，再滴加2～3滴吐温-80，震摇10～15min，最后用自来水冲淋60～80min；

（2）外植体消毒：洗净外植体转移至超净工作台，依次用75%酒精消毒20～30s、无菌水涮洗2～3次，饱和漂白粉溶液消毒20～25min、无菌水涮洗3～4次，0.1%升汞溶液消毒3～4min、无菌水涮洗3～4次，0.05%升汞溶液消毒8～9min、无菌水涮洗6～7次；

（3）丛生芽诱导：将消毒外植体去表面水分，剪去两端伤口，并将其剪成1～2cm长的具芽小段，接种于丛生芽诱导培养基中，在5±2℃的低温下暗培养6天，后转移至在温度为25±2℃的环境下，再继续暗培养10天，后再以光照强度2000～3000LX、日照光12h的光暗交替下培养30～40天；

所述丛生芽诱导培养基的配方为：1/3MS+NAA 0.05～0.1mg/L+CPPU 0.4～0.5mg/L+KT2.0～3.0mg/L+硝酸银 1.5～2.0μg/L+活性炭1.0g/L；

（4）丛生芽增殖：诱导所得丛生芽切成单芽，接种于丛生芽增殖培养基中，在温度为25±2℃的环境下，光照强度2000～3000LX，日照光12h的光暗交替下培养50～60天；

所述丛生芽增殖培养基的配方为：改良WPM+NAA 0.1～0.15mg/L+TDZ 1.0～1.5mg/L+BR 0.1～0.2mg/L+CH 20～30mg/L+牛肉膏1.0～2.0g/L+活性炭0.5g/L；

（5）丛生芽生根：增殖所得丛生芽切成单芽，接种于生根培养基中，在温度为25±2℃的环境下，光照强度3000～4000LX，日照光12h的光暗交替下培养50～60天；

所述生根培养基的配方为：改良WPM+NAA 0.5～0.6mg/L+IBA 0.2～0.3mg/L+牛肉膏3.0～4.0g/L+CH 60～80mg/L+活性炭 0.3g/L；

所述改良WPM为在原WPM培养基的基础上，磷酸二氢钾的浓度改为40mg/L，硝酸铵的浓度改为210mg/L，硫酸镁的浓度改为40mg/L，硫酸钾的浓度改为340mg/L，硝酸钙的浓度改为70mg/L，盐酸硫胺素的浓度改为1.0mg/L，甘氨酸的浓度改为2.5mg/L，其余成分不变。

2.根据权利要求1所述方法在猪笼草繁育中的应用。