[发明专利]具有降血糖功能的香榧肽TGPs-75及其应用

权利要求书

1.一种具有降血糖功能的香榧肽TGPs-75，其特征在于，所述香榧肽TGPs-75包括如下步骤制备得到：利用碱性蛋白酶对香榧蛋白进行酶解，灭酶后对酶解液进行大孔树脂柱分离纯化，所述大孔树脂为DA201-C型，依次用15v/v％、35v/v％、55v/v％、75v/v％乙醇洗脱，收集75v/v％乙醇洗脱液并减压浓缩，得75v/v％乙醇洗脱组分即所述香榧肽TGPs-75。

2.根据权利要求1所述的具有降血糖功能的香榧肽TGPs-75，其特征在于，所述香榧肽TGPs-75具体由如下步骤制备得到：按照3w/v％的底物浓度称取香榧蛋白加蒸馏水制成香榧蛋白溶液，于95℃水浴锅中静置变性15min后冷却至室温，用1.0mol/L NaOH溶液调节pH至10.0，然后加入碱性蛋白酶，所述碱性蛋白酶由地衣芽孢杆菌发酵而来，活性为200U/mg，碱性蛋白酶与香榧蛋白的质量比为5.22：100，于46℃、300r/min下搅拌酶解5.2h；酶解结束后于95℃水浴锅中静置灭酶10min后冷却至室温，于4℃、8000r/min下离心30min，取上清液，-80℃冷冻干燥48h，得到香榧酶解物，于-20℃保存备用；

选用DA201-C大孔树脂柱层析，DA201-C大孔树脂柱尺寸为2.6cm×60cm，加入100mL浓度为10mg/ml的香榧酶解物溶液，所述香榧酶解物溶液为超纯水配制，并在4℃的色谱柜中放置一夜；待树脂吸附平衡后，用超纯水洗去未吸附成功的香榧酶解物，再依次用15v/v％、35v/v％、55v/v％、75v/v％的乙醇溶液进行梯度洗脱，流速恒定为5mL/min，收集75v/v％乙醇洗脱液于45℃下减压浓缩至无乙醇后并于-80℃冷冻干燥48h成粉末，得所述香榧肽TGPs-75。

3.根据权利要求2所述的具有降血糖功能的香榧肽TGPs-75，其特征在于，所述香榧蛋白由如下步骤制备得到：首先将香榧籽去壳后通过液压榨油机冷榨脱脂，条件为室温、50Mpa、40min，得到香榧籽饼粕；之后将得到的香榧籽饼粕粉碎过60目筛，得到香榧籽饼粕粉；将香榧籽饼粕粉和石油醚以质量体积比为1:5的料液比混合，室温、500r/min条件下搅拌提取2h，后室温下进行抽滤，共提取两次后收集滤渣，45℃烘12h，得到香榧籽饼粕脱脂粉，于4℃下冷藏备用；

采用碱提酸沉法提取香榧蛋白：用蒸馏水将上述得到的香榧籽饼粕脱脂粉按照质量体积比为1:20的料液比制成溶液，用1.0mol/L NaOH溶液调节pH至10.0，于50℃、500r/min条件下搅拌提取2h，冷却至室温后，4000r/min离心15min，取上清液，用1.0mol/L HCl溶液调节pH至4.0，静置2h后，4000r/min离心15min，取沉淀，蒸馏水洗至中性后-80℃冷冻干燥48h后得香榧蛋白，于-20℃保存备用。

4.权利要求1-3任一权利要求所述的具有降血糖功能的香榧肽TGPs-75在制备降血糖食品、保健品、药品中的应用。