[发明专利]一种柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法

权利要求书

1.一种柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，其特征在于：用含0.2±0.02％氨水的80±2％乙腈水溶液超声提取样品，经分散固相萃取净化、浓缩复溶，以Kinetex 2.6μm Biphenyl色谱柱分离，0.1±0.01％甲酸水和0.1±0.01％甲酸甲醇为流动相梯度洗脱，电喷雾电离，正离子模式多反应监测下检测，苦参碱以离子对Q1/Q3：249.2/148.3为定量离子对、以离子对Q1/Q3：249.2/150.3为定性离子对，氧化苦参碱以离子对Q1/Q3：265.2/247.3为定量离子对，以离子对Q1/Q3：265.2/148.2为定性离子对，外标法定量。

2.如权利要求1所述的柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，其特征在于：提取样品的方法为：将样品与含0.2±0.02％氨水的80±2％乙腈水溶液混合后，涡旋1±0.2min，超声提取20±2min，向离心管中加5.0g无水硫酸钠，再涡旋提取2±0.2min后，4℃下、9500±500r/min离心5±0.5min，上清液待净化。

3.如权利要求2所述的柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，其特征在于：含0.2±0.02％氨水的80±2％乙腈水溶液的用量为4±0.5mL/g样品；无水硫酸钠的质量用量为样品质量的2±0.2倍。

4.如权利要求1-3任意一项所述的柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，其特征在于：萃取净化的方法为：将提取样品所得的上清液加入到安捷伦QuEChERS试剂净化管中，涡旋2±0.2min，4℃下、5000±500r/min离心5±0.5min，上清液为净化液，安捷伦QuEChERS试剂净化管中装有147.7mg PSA，15.1mg GCB和887.2mg硫酸镁。

5.如权利要求1-3任意一项所述的柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，其特征在于：浓缩复溶的方法为：将萃取净化后的上清液于浓缩管中，于40±2℃水浴中氮吹至近干，加入复溶溶剂溶解，涡旋30±2s，超声2±0.2min，涡旋1±0.1min后，将溶液转移至离心管中，13000±500r/min离心5±0.2min，上清液过0.22μm滤膜后，进行液相色谱-串联质谱测定。

6.如权利要求5所述的柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，其特征在于：复溶溶剂为含0.1±0.01％甲酸的50±1％甲醇水溶液。

7.如权利要求1-3任意一项所述的柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，其特征在于：苦参碱在0.1～50.0ng/mL范围内呈线性关系，回归方程为y＝10399.42713x+191.40500，相关系数r大于0.999。

8.如权利要求1-3任意一项所述的柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，其特征在于：氧化苦参碱在0.1～50.0ng/mL范围内呈线性关系，回归方程为y＝11045.75073x+174.69791，相关系数r均大于0.999。

9.如权利要求1-3任意一项所述的柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，其特征在于：苦参碱检出限为0.05μg/kg，氧化苦参碱检出限0.1μg/kg。