[发明专利]一种柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法

说明书

本发明公开了一种柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，用含0.2±0.02％氨水的80±2％乙腈水溶液超声提取样品，经分散固相萃取净化、浓缩复溶，以Kinetex 2.6μmBiphenyl色谱柱分离，0.1±0.01％甲酸水和0.1±0.01％甲酸甲醇为流动相梯度洗脱，电喷雾电离，正离子模式多反应监测下检测，苦参碱以离子对Q1/Q3：249.2/148.3为定量离子对、以离子对Q1/Q3：249.2/150.3为定性离子对，氧化苦参碱以离子对Q1/Q3：265.2/247.3为定量离子对，以离子对Q1/Q3：265.2/148.2为定性离子对，外标法定量。本发明实现了柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的同时检测，苦参碱检出限为0.05μg/kg，氧化苦参碱检出限0.1μg/kg。

技术领域

本发明涉及一种柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，属于柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留测定的技术领域。

背景技术

我国是柞蚕的发源地，也是世界柞蚕主要养殖国，柞蚕茧年产量约8.5万t，占世界总产量90％以上。柞蚕在野外柞园中放养，柞园与农田及防护林、果园等交错分布，农林害虫防控过程中使用的农药可通过雾滴飘移污染柞树叶而引起柞蚕中毒，从而导致柞蚕严重减产，给蚕茧生产造成巨大经济损失。苦参碱是一种高效广谱植物源杀虫剂，对蛾类和蝶类昆虫的幼虫具有速效性和持久性毒杀作用。近些年来因其具有低毒、低残留等优点，在防治各种松毛虫、茶毛虫、菜青虫等农林害虫领域里被广泛使用。柞蚕与毛虫同为鳞翅目昆虫，苦参碱类农药的施用势必会给柞蚕生产带来安全风险，柞蚕中毒事件时有发生。

柞蚕属于动物源样品，基质复杂，且少量苦参碱和氧化苦参碱即可引起柞蚕中毒，因此，现有技术中虽然也有关于苦参碱残留测定的少许报道，但并不适于柞蚕的检测，如申请号为202011608584.2的专利公开了一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法，用于果蔬类的检测，采用其方法并不能实现对柞蚕的提取和净化，也无法完成对苦参碱和氧化苦参碱的同时检测，且其对苦参碱检出限为0.1mg/kg，对于少量苦参碱即可引起中毒的柞蚕并不适用。目前还未见柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留检测的相关报道，使柞蚕苦参碱类农药残留的风险评估难以进行。

发明内容

本发明提供一种柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，可实现柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的同时检测，苦参碱检出限为0.05μg/kg，氧化苦参碱检出限0.1μg/kg。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：

一种柞蚕中苦参碱和氧化苦参碱残留量的测定方法，用含0.2±0.02％氨水的80±2％乙腈水溶液超声提取样品，经分散固相萃取净化、浓缩复溶，以Kinetex 2.6μmBiphenyl色谱柱(100mm×3.0mm)分离，0.1±0.01％甲酸水和0.1±0.01％甲酸甲醇为流动相梯度洗脱，电喷雾电离(ESI)，正离子模式多反应监测(+MRM)下检测，苦参碱以离子对Q1/Q3：249.2/148.3为定量离子对、以离子对Q1/Q3：249.2/150.3为定性离子对，氧化苦参碱以离子对Q1/Q3：265.2/247.3为定量离子对，以离子对Q1/Q3：265.2/148.2为定性离子对，外标法定量。

本申请％未特别说明的，均为体积百分比。

上述含0.2±0.02％氨水的80±2％乙腈水溶液，指乙腈水溶液中乙腈的体积含量为80±2％，乙腈水溶液中含有0.2±0.02％体积的氨水，以下用80±2％乙腈水溶液(含0.2±0.02％氨水)表示，其它类似表达，含义也类似。0.1±0.01％甲酸水为甲酸体积含量为0.1±0.01％的甲酸水溶液；0.1±0.01％甲酸甲醇为甲酸体积含量为0.1±0.01％的甲酸甲醇溶液，其它类似表达，含义也类似。

上述方法具有较高的灵敏度、准确度和重现性，可用于柞蚕中苦参碱、氧化苦参碱残留量的测定，并为相关产品中苦参碱、氧化苦参碱残留量检测提供了方法依据。