[发明专利]一种FNR突变体及其在基因表达调控中的应用在审
| 申请号： | 202211338027.2 | 申请日： | 2022-10-28 |
| 公开（公告）号： | CN115785234A | 公开（公告）日： | 2023-03-14 |
| 发明（设计）人： | 郭雨奇;杨国雪;向斌 | 申请（专利权）人： | 和度生物技术（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/245 | 分类号： | C07K14/245;C12N15/31;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/67;C07K14/54;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人： | 黄益澍 |
| 地址： | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 fnr 突变体 及其 基因 表达 调控 中的 应用 | ||
1.一种FNR突变体，其特征在于，所述突变体为在所述FNR的氨基酸序列上具有R169G和/或G216D突变，所述FNR的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，或与如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有99％同一性。
2.如权利要求1所述的FNR突变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:4，或SEQID NO:8所示。
3.如权利要求1或2所述的FNR突变体，其特征在于，编码所述FNR突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7所示。
4.一种分离的核酸，其特征在于，所述分离的核酸编码如权利要求1～3任一项所述的FNR突变体。
5.如权利要求4所述的分离的核酸，其特征在于，所述分离的核酸的核苷酸序列如SEQID NO:3或SEQ ID NO:7所示。
6.一种核酸构建体，其特征在于，其包含如权利要求4或5所述的分离的核酸和基因表达盒，所述基因表达盒包括表达调控元件和目的基因；
较佳地，所述表达调控元件为PfnrS启动子；
更佳地，所述目的基因选自IL-10、IL-22。
7.一种基因修饰的细胞，其特征在于，其表达如权利要求1～3任一项所述的FNR突变体或如权利要求6所述的核酸构建体。
8.如权利要求7所述的基因修饰的细胞，其特征在于，所述细胞的宿主细胞包括真核细胞和原核细胞；
较佳地，所述宿主细胞为细菌，优选为大肠杆菌，例如大肠杆菌Nissle 1917。
9.一种提高FNR依赖型启动子调控严谨性的方法，其特征在于，所述方法包括用如权利要求1～3任一项所述的FNR突变体或如权利要求4或5所述的分离的核酸或如权利要求6所述的核酸构建体或权利要求7或8所述的基因修饰的细胞来调控目的基因，使所述目的基因在严格的厌氧环境表达，而在有氧的环境下表达被抑制。
10.一种如权利要求1～3任一项所述的FNR突变体或如权利要求4或5所述的分离的核酸或如权利要求6所述的核酸构建体或权利要求7或8所述的基因修饰的细胞在制备调控基因表达的试剂或调控基因表达方面的应用。
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