[发明专利]A类大豆皂苷乙酰基转移酶GmSSAcT1的制备方法及所用微生物在审
申请号: | 202211343011.0 | 申请日: | 2022-10-31 |
公开(公告)号: | CN115838701A | 公开(公告)日: | 2023-03-24 |
发明(设计)人: | 王国栋;苑佳 | 申请(专利权)人: | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/70;C12N15/54;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大豆 皂苷 乙酰 转移酶 gmssact1 制备 方法 所用 微生物 | ||
1.制备乙酰基转移酶的方法,包括:将乙酰基转移酶基因表达载体导入微生物中,得到产乙酰基转移酶的重组微生物;所述乙酰基转移酶基因表达载体为在出发表达载体中插入乙酰基转移酶基因得到的表达乙酰基转移酶的重组载体;
所述乙酰基转移酶是如下任一种的蛋白质:
A1)氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蛋白质;
A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80%以上的同一性且具有催化大豆皂苷Aa或Ab功能的蛋白质;
A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质,
所述基因编码所述蛋白,所述基因选自下述任一种:
B1)编码链的编码序列是SEQ ID No.2的cDNA分子或DNA分子;
B2)与B1)限定的DNA分子具有80%以上的同一性且编码所述大豆皂苷A乙酰基转移酶的DNA分子。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述乙酰基转移酶蛋白来源于大豆。
3.应用,其特征在于:所述应用为下述任一种:
U1)权利要求1所述的蛋白质在作为大豆皂苷A乙酰基转移酶中的应用;
U2)权利要求1所述的蛋白质、或调控所述蛋白质基因表达的物质或调控所述蛋白活性或含量的物质在制备大豆皂苷A乙酰基转移酶中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述调控所述蛋白质基因表达的物质和所述调控所述蛋白活性或含量的物质为与所述蛋白质相关的生物材料,所述生物材料为下述B1)至B7)中的任一种:
B1)编码权利要求1中所述蛋白质的核酸分子;
B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒;
B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体;
B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物;
B5)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系;
B6)含有B1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有B2)所述表达盒的转基因植物组织;
B7)含有B1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有B2)所述表达盒的转基因植物器官。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:B1)所述核酸分子为编码链的编码序列是SEQ ID No.2的cDNA分子或DNA分子。
6.一种重组大肠杆菌,其特征在于:所述重组大肠杆菌含有权利要求1所述的蛋白的编码基因。
7.如权利要求6所述的重组大肠杆菌,其特征在于:所述重组大肠杆菌表达所述大豆皂苷A乙酰基转移酶。
8.如权利要求6或7所述的重组大肠杆菌,其特征在于:所述大豆皂苷A乙酰基转移酶选自下述任一种蛋白质:
1)氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蛋白质;
2)将1)所示的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与1)所示的蛋白质具有80%以上的同一性且具有催化大豆皂苷Aa或Ab功能的蛋白质;
3)在1)或2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。
9.如权利要求6至8中任一所述的重组大肠杆菌,其特征在于:所述重组大肠杆菌的构建方法包括将所述大豆皂苷A乙酰基转移酶基因导入受体菌中得到所述重组大肠杆菌。
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