[发明专利]一种检测汉防己甲素脂质体包封率载药率的方法

说明书

本发明公开了一种检测汉防己甲素脂质体包封率载药率的方法，涉及医药检测技术领域，其技术方案要点是：制备TPGS修饰的汉防己甲素脂质体，用甲醇对TPGS修饰的汉防己甲素脂质体进行破乳；打开紫外可见分光光度计，进行测量，测定其吸光值A₂₈₂；将测定的吸光值A₂₈₂代入标准曲线，计算TPGS修饰的汉防己甲素脂质体中汉防己甲素含量，从而计算TPGS修饰的汉防己甲素脂质体的包封率和载药率。用紫外分光光度计对TPGS修饰的汉防己甲素脂质体进行检测，通过分析物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来测定分析物成份，其覆盖面广、选择性好、灵敏、准确，简单方便、成本低，可用于测量汉防己甲素浓度，用于汉防己甲素脂质体包封率、载药率的测量。

技术领域

本发明涉及医药检测技术领域，更具体地说，它涉及一种检测汉防己甲素脂质体包封率载药率的方法。

背景技术

汉防己甲素(Tetrandrine,Tet)是一种双苄基异喹啉类生物碱，具有消炎、镇痛、抗过敏、抗纤维化等作用，在眼科领域，已被验证其可治疗角膜表层屈光术后并发症角膜上皮下雾状混浊(haze)，干眼，病毒性角膜炎，角膜新生血管等角膜疾病，但汉防己甲素水溶性差，使其在角膜的生物利用率底，因此越来越多的研究者在开发制备具有较高包封率的汉防己甲素脂质体。脂质体是类脂双分子层结构，可携带疏水物质和亲水性物质，提高药物与组织的生物相容性；维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(Vitamin Epolyethylene glycolsuccinate,TPGS)是由亲水、亲脂基团组成，具有表面活性剂的性质，已被证明可提高疏水性药物的溶解性、延长药物半衰期。

对于汉防己甲素药物测量的方法有紫外分光光度法、高效液相色谱法以及高效液相色谱联合质谱等方法，高效液相色谱法是通过不同物质在流动相和固定相中的选择性分离来测定物质成分的，其检测耗时较长；高效液相色谱联合质谱法的原理是样品在液相色谱仪中被分离后各组分依次进入质朴检测器又被离子源电离，产生带有一定电荷及质量数不同的离子，这些离子在磁场中运动行为不同，因而被质量分析器按质荷比(m/z)分开并排列形成质谱图，通过处理分析质谱图，得到样品的定性定量结果。高效液相色谱法和高效液相色谱联合质谱法的缺点是需要各种色谱柱、容量小，所需流动相消耗大且多有毒、这些仪器设备比较复杂、价格昂贵，很多小型实验室没有这些仪器。

因此需要开发一种快速简便测量TPGS修饰的汉防己甲素脂质体包封率和载药率的方法，以期为汉防己甲素脂质体包封率、载药率的测量提供方法及指导，同时也用于汉防己甲素正交试验筛选脂质体最佳处方，为汉防己甲素脂质体的制备提供理论依据。

发明内容

本发明的目的是提供一种检测汉防己甲素脂质体包封率载药率的方法，以期为汉防己甲素脂质体包封率、载药率的测量提供方法及指导，同时也用于汉防己甲素正交试验筛选脂质体最佳处方，为汉防己甲素脂质体的制备提供理论依据。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种汉防己甲素脂质体的制备方法，包括如下步骤方法：

S1：准确称量一定量的汉防己甲素、大豆卵磷脂、胆固醇和TPGS并置于圆底烧瓶内；

S2：向圆底烧瓶内加入三氯甲烷并将圆底烧瓶置于超声波清洗器上声震3min，使上述物质完全溶解后固定在旋转蒸发仪上使三氯甲烷蒸发，在圆底烧瓶内壁形成一层均质薄膜；

S3：取下圆底烧瓶置于干燥通风处使三氯甲烷有机溶剂充分挥发；取药液置于圆底烧瓶中水化脂质体薄膜，使脂质体薄膜全部水化并置于试管中；

S4:将试管置于冰上，用声震仪声震将脂质体洗脱下；将声震好的脂质体置于4°低温离心机中8000rmp离心10min、弃上清、取沉淀、5mlPBS重悬，重复该操作3次，取最后一次离心后的沉淀即得制备的TPGS修饰的汉防己甲素脂质体。

本发明进一步设置为：所述步骤S1中称量汉防己甲素6mg、大豆卵磷脂5mg、胆固醇2mg、TPGS 3mg；所述步骤S2中加入8ml三氯甲烷。