[发明专利]重组的转氨酶及其酶制剂和应用在审
申请号: | 202211395614.5 | 申请日: | 2022-11-09 |
公开(公告)号: | CN115927239A | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 龙海;邬小兵;魏巍;何文玲 | 申请(专利权)人: | 重庆普佑生物医药有限公司 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00;C12R1/19 |
代理公司: | 北京太兆天元知识产权代理有限责任公司 11108 | 代理人: | 张洪年 |
地址: | 404008 重庆市万州区*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组 转氨酶 及其 酶制剂 应用 | ||
1.重组的转氨酶,其特征在于:该重组转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种编码权利要求1所述的重组转氨酶的基因,其特征在于:所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.一种重组菌株,其特征在于,所述重组菌种表达如SEQ ID NO:1所示的重组转氨酶。
4.根据权利要求3所述的重组菌株,其特征在于,以pET-30a质粒为表达载体表达重组转氨酶。
5.根据权利要求3或4所述的重组菌株,其特征在于:以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主细胞。
6.根据权利要求5所述的重组菌株,其特征在于:所述重组菌株是将如SEQ ID NO:2所示的转氨酶基因连接到pET-30a质粒的BamH I和XhoI位点,然后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中形成。
7.一种转氨酶酶制剂,其特征在于:所述酶制剂包含由权利要求3至6中任意一项所述的重组菌种发酵生产得到。
8.权利要求3至6中任意一项所述的重组菌种发酵生产转氨酶的方法,其特征在于:将转氨酶重组菌株种子液按照2%的接种量转接于LB培养基中,37℃培养至OD600=0.6时,加入50μl 0.5mol/L的IPTG,18℃诱导14h,即转氨酶发酵液。
9.利用权利要求8所述的重组菌种发酵生产转氨酶的方法获得的转氨酶在催化酮类化合物转氨反应制备手性胺中的应用,所述酮类化合物是指式II化合物或其类似化合物,
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:述转氨酶在制备替格瑞洛手性中间体化合物的应用,合成工艺路线如下所示:
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