[发明专利]一种百合药材中王百合苷A和王百合苷H的提取及测定方法在审
申请号: | 202211398625.9 | 申请日: | 2022-11-09 |
公开(公告)号: | CN115629144A | 公开(公告)日: | 2023-01-20 |
发明(设计)人: | 周宽;张晓云;曾亚文;周永全;但济修;李淞明;詹常森 | 申请(专利权)人: | 上海和黄药业有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 许亦琳;余明伟 |
地址: | 201401 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 百合 药材 提取 测定 方法 | ||
1.一种百合药材中王百合苷A和王百合苷H的提取方法,包括:将百合药材样品加入稀甲醇溶解后超声提取,以提供所需提取液。
2.根据权利要求1所述的一种百合药材中王百合苷A和王百合苷H的提取方法,其特征在于,包括以下条件中的任一项或多项:
A1)所述百合药材样品为将百合药材粉碎后过筛,获得的百合药材粉末;
A2)所述稀甲醇为甲醇水溶液;优选地,所述甲醇水溶液为体积百分比为30~70%的甲醇水溶液;
A3)所述百合药材样品加入的质量与稀甲醇加入的体积之比为1:20~80;
A4)所述超声提取的时间为40~80分钟;
A5)所述超声提取的功率为200~350W;所述超声提取的频率为40~59KHz;
A6)所述超声提取后还要进行放冷、离心、过滤。
3.根据权利要求2所述的一种百合药材中王百合苷A和王百合苷H的提取方法,其特征在于,所述A6)项包括以下条件中的任一项或多项:
B1)所述放冷冷却至室温;
B2)所述离心的时间为5-15min;
B3)所述离心的转速为8000-12000r/min;
B4)所述过滤为取上清液过滤膜,放弃初滤液后,取续滤液。
4.一种百合药材中王百合苷A和王百合苷H的测定方法,包括:将权利要求1-3任一所述的百合药材中王百合苷A和王百合苷H的提取方法获得的提取液作为供试品溶液,采用高效液相色谱法进行检测,确定供试品溶液中王百合苷A和王百合苷H的含量。
5.根据权利要求4所述的一种百合药材中王百合苷A和王百合苷H的测定方法,其特征在于,采用高效液相色谱法进行检测,包括以下步骤:
1)配制混合对照品溶液:将王百合苷A和王百合苷H的对照品,加入稀甲醇溶解并定容,配成混合对照品溶液;
2)样品检测:采用高效液相色谱法分别检测供试品溶液和步骤1)中的混合对照品溶液,比较保留时间进行定性,采用外标法进行定量,确定供试品溶液中王百合苷A和王百合苷H的含量。
6.根据权利要求5所述的一种百合药材中王百合苷A和王百合苷H的测定方法,其特征在于,步骤1)中包括以下条件中的任一项或多项:
C1)所述混合对照品溶液中王百合苷A的含量范围为0.08624~0.8624μg/mL,王百合苷H的含量范围为0.01668~0.1668μg/mL;
C2)同一所述混合对照品溶液中王百合苷A与王百合苷H的浓度比为5.0~5.5∶1;
C3)所述稀甲醇为甲醇水溶液;优选地,所述甲醇水溶液为体积百分比为30~70%的甲醇水溶液。
7.根据权利要求5所述的一种百合药材中王百合苷A和王百合苷H的测定方法,其特征在于,步骤2)中,所述高效液相色谱法的检测条件包括:检测器为紫外-可见分光检测器或二极管阵列检测器;色谱柱为C18色谱柱;检测波长为310~314nm;流动相为乙腈-0.09~0.11%磷酸水溶液,其中,A相为乙腈,B相为0.09~0.11%磷酸水溶液;分析时间为30min;梯度洗脱。
8.根据权利要求5所述的一种百合药材中王百合苷A和王百合苷H的测定方法,其特征在于,步骤2)中,所述高效液相色谱法的检测条件还包括以下条件中的任一项或多项:
D1)柱温为30~40℃;
D2)流速为0.9~1.1mL/min;
D3)进样量为5~20μL。
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