[发明专利]血栓弹力图凝血激活检测试剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种血栓弹力图凝血激活检测试剂及其制备方法，该试剂包括以下组分：缓冲液、盐离子化合物、高岭土、磷脂、组织因子酯化物、抗氧化剂、水解明胶、冻干保护剂以及防腐剂，所述水解明胶的质量浓度为0.1％‑10％。本发明提供的血栓弹力图凝血激活检测试剂，在常用冻干保护剂基础上添加水解明胶，使得冻干后试剂不但稳定性好，抗潮能力也大大增加，无需对测试杯进行压膜密封处理，可以直接将试剂冻干于测试杯中，与现有同类产品以及技术相比，无需对试剂进行复溶、转移，取出即可用，不但简化了生产工艺，同时也简化了操作流程，减少测试前过多操作带来的误差，更适用于全自动血栓弹力图仪。

技术领域

本发明涉及凝血检测领域，特别涉及一种血栓弹力图凝血激活检测试剂及其制备方法。

背景技术

TEG是一种全血粘弹性检测技术，粘弹性检测的本质是对阻力或摩擦力的记录，通过在模拟人体体内环境中全血标本的血液粘弹性变化来反映血液凝固的动态变化，用物理学原理监测从凝血因子激活到形成血小板-纤维蛋白、血小板聚集、形成稳定的血凝块再到纤维蛋白溶解的过程，以此来反映血凝块形成的速率、强度及稳定性(纤溶水平)，这是对凝血与纤溶的全过程进行功能性评估。TEG可以实时连续反映除血管因素外所有血液成分参与的整个的凝血过程，以此判断患者出血及血栓的风险。TEG能更敏感更全面评估凝血的异常状态，预测患者出血与死亡的风险，有利于临床医生清晰明确的制定输血策略、指导合理用药及抗血栓等临床治疗，可有效控制患者的死亡率。

快速TEG检测项目所使用的检测试剂为凝血激活检测试剂，包含高岭土、组织因子，同时激活内源性和外源性凝血途径，与普通TEG检测项目相比，检测时间更短，可在10min左右对患者凝血功能全貌进行评估。快速TEG适用于急诊创伤后凝血功能异常的诊断和实时检测。快速TEG的主要检测参数包括：TEG ACT、R、K、Angle、MA等。激活全血凝固时间(ACT)能够快速预测输血的需求，其延长提示凝血因子缺乏或血液稀释；凝血反应时间(R)指检测开始到描记幅度达到2mm的时间，用于评估凝血启动过程中凝血因子的综合作用；血液凝血时间(K)和凝固角(Angle)反映血凝块形成的速度，主要与纤维蛋白原水平和功能相关；最大振幅(MA)为血凝块的最大强度时的振幅，主要反映由凝血酶激活的血小板和纤维蛋白原在止血中的作用。

市场上现有的血栓弹力图仪以半自动为主，存在自动化能力弱，检测通道较少，人工操作误差等不足，因此全自动设备的需求和应用也越来也多。市面上现有血栓弹力图仪配套凝血激活检测试剂，不管是半自动还是全自动，均需要对凝血激活检测试剂进行复溶，然后吸取检测试剂到测试杯中，才能进行下一步操作，操作过程繁琐。如CN108982865A描述冻干试剂在半自动血栓弹力图中的检测过程：从2-8℃环境中取出试剂，室温平衡一段时间后加20ul水复溶，再吸取10ul复溶试剂加入测试杯，之后再加入氯化钙溶液和检测样本。CN108761104A公开了一种液体凝血激活剂的操作流程：将冷藏试剂常温放置，恢复至室温。装载测试杯，移取氯化钙溶液和凝血激活剂，再加入检测样本。CN207516385公开了一种快速血栓弹力图仪检测试剂盒：将试剂盒分为血样试剂瓶和助剂试剂瓶。抽取1mL血样，依次与装有组织因子的助剂试剂瓶、装有磷脂的助剂试剂瓶和装有高岭土的助剂试剂瓶内试剂混合，转移入血样试剂瓶存放，然后配合血栓弹力图进行上机检测。目前，市售主要产品如乐普医疗及Haemonetics等凝血激活检测试剂盒均为西林瓶装样冻干粉，为保证检测试剂的密封性，冻干结束后进行真空压塞，并加盖铝塑盖，若密封不当，可能会试剂盒失活。同时测试前需加入纯化水复溶，上下颠倒混匀后再转移至测试杯中用于检测。此过程中复溶不充分，转移操作过程产生的误差均影响检测结果准确性。大多数全自动设备配套凝血激活检测试剂盒与半自动设备一致，仍采用西林瓶装样试剂，操作步骤复杂。深圳沃德生命科技有限公司研制出一种单人份试剂卡，但为了保证试剂密封性，需要对试剂卡进行铝封操作，同时还需要对检测试剂进行复溶、转移。

发明内容