[发明专利]一种伊多塞班中间体2有关物质的HPLC检测方法

说明书

本发明公开了一种伊多塞班中间体2有关物质的HPLC检测方法，用纯化水作为稀释剂溶解，定量稀释制成含伊多塞班中间体2、已知杂质M07、M08、吡啶的系统适用性溶液，定量稀释制成含伊多塞班中间体2的供试品溶液以及定量限溶液，系统适用性溶液、供试品溶液、定量限溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图，检测供试品的有关物质百分面积；本发明该方法采用高效液相色谱法，使用纯化水为稀释剂对伊多塞班中间体2的有关物质进行测定，该方法伊多塞班中间体2及其有关物质与相邻峰之间分离度符合要求，专属性强，线性良好，重复性佳，供试品配制方便。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及药物的分析检测方法，特别涉及一种用HPLC检测伊多塞班中间体2及其有关物质的方法。

背景技术

伊多塞班，又名依度沙班，它是日本第一三共株式会社研制的小分子口服抗凝药，为凝血因子X(FXa)抑制剂。凝血过程中，活化的凝血因子X(FXa)将凝Chemicalbook血酶原(FII)激活成为凝血酶(FIIa)，促使纤维蛋白形成，由此形成血栓，因而FXa已成为开发新一代抗凝药物的主要靶点。

伊多塞班中间体2，又名依度沙班杂质A(单草酸盐)、依度沙班中间体2，英文名称为Tert-Butyl [(1R,2S,5S)-2-amino-5-[(dimethylamino)carbonyl]cyclohexyl]carbamate oxalate，化学名称为[(1R,2S,5S)-2-氨基-5-[(二甲基氨基)羰基]环己基]氨基甲酸叔丁酯草酸盐，分子式为C₁₆H₂₉N₃O₇，分子量为375.42，CAS号为1210348-34-7，化学结构式如下：

。

依据源头控制、过程控制理念，制备伊多塞班，伊多塞班中间体2也需建立有效的检测方法实行严格控制。经检索，目前未见伊多塞班中间体2的有关物质检测方法的相关专利或公开文献报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种伊多塞班中间体2的有关物质检测方法，该方法专属性强，线性良好，重复性佳，可应用于伊多塞班中间体2杂质控制。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种伊多塞班中间体2有关物质的HPLC检测方法，所述伊多塞班中间体2化学名称为[(1R,2S,5S)-2-氨基-5-[(二甲基氨基)羰基]环己基]氨基甲酸叔丁酯草酸盐，分子式为C₁₆H₂₉N₃O₇，结构式为

，

控制的已知杂质M07、M08和吡啶（Py）的结构式分别为

，，；

采用反相高效液相色谱法，使用紫外检测器，HPLC检测条件如下：色谱柱：ZefexSupfex AQ-C18，150*4.6mm，5μm，亲水性C18色谱柱，柱温为40℃，常规温度，适用于大多数仪器；流动相：水相：20mM 高氯酸钠缓冲液；有机相：乙腈；流速为1.0 ml/min；洗脱程序：梯度洗脱；检测波长：210nm；包括以下步骤：

（1）取伊多塞班中间体2、已知杂质M07、M08、吡啶（Py）用纯化水作为稀释剂溶解，定量稀释制成每1ml稀释剂含2.0mg伊多塞班中间体2、0.02mg已知杂质M07、0.02mg已知杂质M08、0.02mg已知杂质吡啶（Py）的系统适用性溶液；

（2）取伊多塞班中间体2用纯化水作为稀释剂溶解，定量稀释制成每1ml稀释剂含2.0mg伊多塞班中间体2的供试品溶液；

（3）取伊多塞班中间体2用纯化水作为稀释剂溶解，定量稀释制成每1ml稀释剂含0.001mg伊多塞班中间体2的定量限溶液；

（4）取5μl系统适用性溶液、供试品溶液、定量限溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，完成伊多塞班中间体2的有关物质的检测。