[发明专利]一种基于SCoT分子标记的郑艾2号假杂种鉴定方法

权利要求书

1.一种基于SCoT分子标记的郑艾2号假杂种鉴定方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

（1）提取待鉴定样品基因组

参考现有技术，常规提取待检艾草样品的DNA基因组，备用；

同时，以郑艾2号叶片样品的DNA基因组为对照；

（2）PCR扩增

采用如SEQ ID No.1~7的任一引物序列进行PCR扩增；具体引物序列如下：

SCoT7：5’-CAACAATGGCTACCACGG-3’；

SCoT8：5’-CAACAATGGCTACCACGT-3’；

SCoT10：5’-CAACAATGGCTACCAGCC-3’；

SCoT25：5’-ACCATGGCTACCACCGGG-3’；

SCoT26：5’-ACCATGGCTACCACCGTC-3’；

SCoT27：5’-ACCATGGCTACCACCGTG-3’；

SCoT76：5’-CCATGGCTACCACTACCG-3’；

（3）鉴定

首先，依据表型差异，对待检艾草与郑艾2号表型进行对比，从而对待检艾草是否属于“假杂种”进行初步判定；

随后，依据待检艾草样品PCR扩增结果与郑艾2号扩增结果进行比对判定，如果条带结果不一致，则判定待检艾草样品为“假杂种”；如果条带结果一致，则判定待检艾草为郑艾2号。

2.如权利要求1所述基于SCoT分子标记的郑艾2号假杂种鉴定方法，其特征在于，步骤（2）中，PCR扩增时，15μL反应体系设计如下：

引物，1.0μL；

2x Tag Master Mix，9μL；

DNA模板，3μL、50ng/µl；

其余部分用ddH₂O补充至15μL；

PCR反应程序：94℃预变性5min；94℃变性90s，50℃退火60s，72℃延伸温度90s，35个循环；72℃延伸温度8min。

3.如权利要求2所述基于SCoT分子标记的郑艾2号假杂种鉴定方法，其特征在于，扩增结束后，对反应产物进行1.2%琼脂糖凝胶电泳检测。

4.郑艾2号鉴定用SCoT分子标记，其特征在于，所述分子标记为SEQ ID No.1~7的引物序列，具体如下：

SCoT7：5’-CAACAATGGCTACCACGG-3’；

SCoT8：5’-CAACAATGGCTACCACGT-3’；

SCoT10：5’-CAACAATGGCTACCAGCC-3’；

SCoT25：5’-ACCATGGCTACCACCGGG-3’；

SCoT26：5’-ACCATGGCTACCACCGTC-3’；

SCoT27：5’-ACCATGGCTACCACCGTG-3’；

SCoT76：5’-CCATGGCTACCACTACCG-3’。

5.权利要求4所述SCoT分子标记在郑艾2号鉴定中的应用。