[发明专利]一种狐、貉肺炎三联灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明涉及一种狐、貉肺炎三联灭活疫苗及其制备方法，属于疫苗制备技术领域。该疫苗由筛选的大肠杆菌DC176‑2株，保藏编号为CGMCC No:25233、肺炎克雷伯菌FY170‑1株，保藏编号CGMCC No:252234、奇异变形杆菌QY23‑1株，保藏编号CGMCC No:25235疫苗株灭活作为抗原组成，可同时预防由大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌以及三者混合感染的狐、貉肺炎。该疫苗制作方便、成本低廉、无明显副作用，具有较好的免疫原性及安全性，能有效地提供同源攻毒保护及交叉保护，可达到一针多防的效果，简化了疫苗接种的免疫程序，提高了保护效率。

技术领域

本发明属于疫苗制备技术领域，尤其涉及一种大肠杆菌DC176-2株、肺炎克雷伯菌FY170-1株和奇异变形杆菌QY23-1株三联灭活疫苗及制备方法。

背景技术

狐、貉是我国饲养毛皮动物的主要品种，主要分布在山东、辽宁、吉林、黑龙江等地，以沿海地区居多。狐、貉肺炎是毛皮动物高发的传染病之一，该病高发季为处于高温高湿的7-9月份。8月中、下旬是激素毛皮动物换毛期，也是病原微生物大量繁殖期。换毛期的动物抵抗力下降；脱落的毛绒随风飞扬，刺激呼吸道黏膜，所携带的微生物容易侵害动物传播疾病。

以往的研究认为引起肺炎的常见致病菌有绿脓杆菌、巴士杆菌、克雷伯氏菌、肺炎双球菌等，但对2019-2020年黑龙江省、河北省、吉林省的六十二个规模化狐貉养殖场肺炎病死病例病原分离结果显示，引发狐貉肺炎的病原菌主要是肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌和奇异变形杆菌。随着各种抗生素药物的广泛使用，导致其耐药性增强，多重耐药菌株的出现，导致该病的死亡率达到60％-100％，给养殖场(户)造成了近乎毁灭性的打击。

目前国内厂家主要制备单价疫苗及不同血清型的多价灭活疫苗，但随着狐、貉养殖业的发展，狐、貉疾病的发生主要以二重感染和多重感染为主，单价疫苗不能达到预防多种疾病的效果，但市场上尚没有针对肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌流行株的狐貉肺炎三联疫苗，致使该病得不到合理有效的防治。

发明内容

本发明提供一种狐、貉肺炎三联灭活疫苗及其制备方法，以解决市场上尚没有针对肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌流行株的狐貉肺炎三联疫苗，致使该病得不到合理有效防治的问题。

本发明采取的技术方案是，包括抗原和常规疫苗佐剂，所述抗原包括狐、貉源大肠杆菌(Escherichia coli)DC176-2株，保藏编号为CGMCC No:25233、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)FY170-1株，保藏编号CGMCC No:25234、奇异变形杆菌(Proteusmirabilis)QY23-1株，保藏编号CGMCC No:25235；保藏日期：2022年7月4日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

本发明所述狐、貉源大肠杆菌DC176-2株的16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID No.1所述。

本发明所述肺炎克雷伯菌FY170-1株的16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID No.2所述。

本发明所述奇异变形杆菌QY23-1株的16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID No.3所述。

本发明所述三联灭活疫苗应用于预防由狐、貉大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌三种病原菌引发的狐、貉肺炎。

本发明所述疫苗中灭活前的各细菌浓度均不少于5×10⁷CFU/mL。

本发明所述大肠杆菌DC176-2株、肺炎克雷伯菌FY170-1株、奇异变形杆菌QY23-1株比例为1∶1∶1。

本发明所述抗原均使用甲醛灭活。

本发明所述佐剂为氢氧化铝胶佐剂。