[发明专利]一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法

权利要求书

1.一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：样品的前处理及供试品溶液的制备：

S11：采集处理样品1：取肾衰竭患者的血液5ml，3000r/min离心10分钟后，取上清液经0.45μm滤膜过滤后，放置于2-8℃冰箱备用；

S12：采集处理样品2：取肾衰竭患者的尿液、腹膜透析废液5ml，取上清液经0.45μm滤膜过滤后，放置于2-8℃冰箱备用；

S13：制备供试品贮备液：精密量取样品1或样品2，3ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；

S14：制备供试品溶液：精密量取5ml供试品贮备液置比色管中，加0.1％的8-羟基喹啉乙醇溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml，混匀，加入次溴酸钠溶液4ml，混匀静置5min后，再加10％的盐酸胍水溶液2ml，混匀，作为供试品溶液；

S2：对照品溶液的制备：

取2-胍基琥珀酸对照品，精密称定，加水溶解并稀释，制成每1ml中含2-胍基琥珀酸300μg；

S3：对照品线性溶液的制备：

线性对照品溶液：精密量取对照品溶液0.5ml、1ml、2ml、3ml和4ml，分别置比色管中，依次加水4.5ml、4ml、3ml、2ml、1ml，加0.1％的8-羟基喹啉乙醇溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml，混匀，加入次溴酸钠溶液4ml，混匀静置5min后，再加10％的盐酸胍水溶液2ml，混匀，分别作为线性对照品溶液1/2/3/4/5；

S4：空白溶液的制备：

精密量取水5ml置比色管中，加0.1％的8-羟基喹啉乙醇溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml，混匀，加入次溴酸钠溶液4ml，混匀静置5min后，再加10％的盐酸胍水溶液2ml，混匀；

S5：分别取上述各溶液照紫外可见分光光度法检测；

计算公式：

式中：58为：胍基分子量；

175为：2-胍基琥珀酸分子量；

10/3为：供试品贮备液的稀释倍数；

A为：供试品溶液吸光度值扣空白后的吸光度值；

b为：线性方程的截距；

s为：线性方程的斜率；

13为：供试品溶液总体积，ml；

5为：供试品贮备液取样量，ml。

2.根据权利要求1所述的一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法，其特征在于：所述步骤S5的测定条件为：波长为500nm，积分时间0.2s。

3.根据权利要求1所述的一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法，其特征在于：所述的次溴酸钠应不低于分析纯级别；所述的8-羟基喹啉应不低于分析纯级别。

4.根据权利要求1所述的一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法，其特征在于：所述的氢氧化钠应不低于分析纯级别；所述的盐酸胍应不低于分析纯级别；所述的乙醇应不低于分析纯级别的95乙醇。

5.根据权利要求1所述的一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法，其特征在于：所述步骤S1中处理好的样品1和样品2需要进行密封存放于冰箱内。