[发明专利]一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法

说明书

本发明公开了一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法，包括以下步骤：S1：样品的前处理及供试品溶液的制备：S11：采集处理样品1：取肾衰竭患者的血液5ml，3000r/min离心10分钟后，取上清液经0.45μm滤膜过滤后，放置于2‑8℃冰箱备用；S12：采集处理样品2：取肾衰竭患者的尿液、腹膜透析废液5ml，取上清液经0.45μm滤膜过滤后，放置于2‑8℃冰箱备用；S13：制备供试品贮备液：精密量取样品1或样品2，3ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；本发明建立了一种能够测定肾衰竭患者体液中胍类总量的方法，解决了测定溶液易褪色的问题，实现了肾衰竭患者体液中胍基的精准检测；测定方法简单，便于操作且耗时短；不仅提高了检测效率，同时还提高产品的质量和安全性。

技术领域

本发明属于医药测试技术领域，具体涉及一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法。

背景技术

肾功能衰竭患者，丧失了部分或者全部肾脏排泄功能，体内许多蛋白质最终代谢产物不能排出而蓄积于体内，因而可引起一系列中毒症状，故这类物质称为毒性物质。而除尿素、肌酐外，胍类也是主要的毒性物质，因此，严格控制患者体内的胍类物质的含量，如何对其含量进行准确的定量分析，具有十分重要的意义。

目前各标准和文献中均未收载肾衰竭患者体液中胍类总量的测定方法，仅有部分收载关于甲基胍的测定方法，大多采用气相色谱法或者荧光法，且测定前需要衍生处理，极大影响了测定结果的准确性。体液(血液、尿液)中成分复杂，含有多种蛋白质、有机和无机的小分子类，大量的代谢产物中不可能仅仅只有一种甲基胍，胍类总量直接影响了病人体内的毒素水平，因此想要更加了解病人体内毒素的累积情况，胍基总量的测定方法显的尤为重要。为此本发明提出了一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种肾衰竭患者体液中胍类总量的检测方法，包括以下步骤：S1：样品的前处理及供试品溶液的制备：

S11：采集处理样品1：取肾衰竭患者的血液5ml，3000r/min离心10分钟后，取上清液经0.45μm滤膜过滤后，放置于2-8℃冰箱备用；

S12：采集处理样品2：取肾衰竭患者的尿液、腹膜透析废液5ml，取上清液经0.45μm滤膜过滤后，放置于2-8℃冰箱备用；

S13：制备供试品贮备液：精密量取样品1或样品2，3ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；

S14：制备供试品溶液：精密量取5ml供试品贮备液置比色管中，加0.1％的8-羟基喹啉乙醇溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml，混匀，加入次溴酸钠溶液4ml，混匀静置5min后，再加10％的盐酸胍水溶液2ml，混匀，作为供试品溶液；

S2：对照品溶液的制备：

取2-胍基琥珀酸对照品，精密称定，加水溶解并稀释，制成每1ml中含2-胍基琥珀酸300μg；

S3：对照品线性溶液的制备：

线性对照品溶液：精密量取对照品溶液0.5ml、1ml、2ml、3ml和4ml，分别置比色管中，依次加水4.5ml、4ml、3ml、2ml、1ml，加0.1％的8-羟基喹啉乙醇溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml，混匀，加入次溴酸钠溶液4ml，混匀静置5min后，再加10％的盐酸胍水溶液2ml，混匀，分别作为线性对照品溶液1/2/3/4/5；

S4：空白溶液的制备：

精密量取水5ml置比色管中，加0.1％的8-羟基喹啉乙醇溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml，混匀，加入次溴酸钠溶液4ml，混匀静置5min后，再加10％的盐酸胍水溶液2ml，混匀；