[发明专利]一种检测干制鱼制品中4-羟基-己烯醛和4-羟基-壬烯醛的方法

说明书

本发明涉及一种检测干制鱼制品中4‑羟基‑己烯醛和4‑羟基‑壬烯醛的方法，包括以下步骤：称取适量样品，加入2,6‑二叔丁基‑4‑甲基苯酚、混合内标溶液以及衍生液，涡旋，均质，黑暗衍生，加入二氯甲烷，离心取下清液，合并，加入二氯甲烷定容；移取提取液吹干，加入淋洗液，超声溶解，待净化；用二氯甲烷和淋洗液平衡SPE柱，将待净化溶液过滤至SPE柱中，加入淋洗液淋洗得到目标物，三氯甲烷洗脱目标物，收集洗脱液，氮吹至干，加入甲醇，超声溶解，过滤，得样品溶液；液相色谱‑串联质谱仪测定，内标法定量。该方法能够直接对干制鱼制品进行衍生处理及提取，无需进一步提取油脂，前处理过程可操作性强，检测结果准确、高效。

技术领域

本发明属于食品检测技术领域，涉及干制鱼制品中两种小分子醛的检测，具体涉及一种检测干制鱼制品中4-羟基-己烯醛和4-羟基-壬烯醛的方法。

背景技术

鱼类干制品作为我国传统的加工产品，因风味独特且可长期保存，深受沿海居民欢迎。但是鱼类中的不饱和脂肪酸含量较高，在干制过程中，光、热、金属离子和自由基等促氧化因子会引发脂肪氧化，产生4-羟基-己烯醛(HHE)和4-羟基-壬烯醛(HNE)等有害活泼羰基化合物，对产品的品质和食用安全产生不良影响，已引起了业界广泛关注。

目前，针对4-羟基-己烯醛(HHE)和4-羟基-壬烯醛(HNE)等有害活泼羰基化合物的检测方法中，高效液相色谱法单纯利用保留时间定性的准确度不高，气相色谱-质谱联用(GC-MS)能够比较准确的对羰基化合物进行定性定量分析，允许在许多情况下指定结构，但其高分子量和极性会增加鉴定的困难，分子离子的缺失也限制了这项技术的应用，而且此法分析时间较长，对于同时检测多种羰基化合物并不适用。现有的已建立的液相色谱分离与串联质谱(LC-MS/MS)联用的分析方法中，并未涉及到检测干制鱼制品中HHE和HNE的方法，而是用于检测油样、油脂或油基食品中的HHE和HNE。其中，有期刊在检测油样中丙二醛(MDA)、4-羟基-己烯醛(HHE)、4-羟基-壬烯醛(HNE)和2，4-癸二烯(2,4-DECA)的分析方法，采用了液相色谱串联质谱仪，可以在同一次运行中分析油样中的MDA、HHE、HNE和2,4-DECA，对MDA有很好的准确度，对其他3种醛在指定浓度下有一定的准确度。

综上，国内外尚未建立针对干制鱼制品中4-羟基-己烯醛(HHE)和4-羟基-壬烯醛(HNE)等有害活泼羰基化合物标准检测方法，而基于食品体系较为复杂的特点，目前迫切需要制定准确、高效、易操作的HHE和HNE的检测标准方法，以满足对干制水产品，尤其是对干制鱼制品中HHE和HNE进行同时定性和定量测定的急切需求。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术中存在的上述问题，提出了一种检测干制鱼制品中4-羟基-己烯醛和4-羟基-壬烯醛的方法，该方法能够直接对干制鱼制品进行衍生处理及提取，无需进一步提取油脂，前处理过程可操作性强，检测结果准确、高效。

本发明的技术方案是：

一种检测干制鱼制品中4-羟基-己烯醛和4-羟基-壬烯醛的方法，包括以下步骤：

(1)称取适量样品，加入2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、混合内标溶液以及衍生液，涡旋，均质，黑暗中衍生1.5～2.5h，加入二氯甲烷，提取离心，取下清液，重复提取数次后合并提取液，加入二氯甲烷定容；然后移取适量提取液，氮吹至干，加入淋洗液，超声溶解，待净化；

(2)采用二氯甲烷和淋洗液平衡SPE柱，将步骤(1)待净化的溶液过滤至SPE柱中，加入淋洗液淋洗得到目标物，采用三氯甲烷洗脱目标物，收集洗脱液，氮吹至干，加入甲醇，超声溶解，过滤，即得待测的样品溶液；

(3)将样品溶液采用液相色谱-串联质谱仪进行测定，内标法定量。

上述方法的检测基质是干制鱼制品，直接在鱼肉等部分中进行衍生处理及提取，无需进一步提取油脂，前处理操作更为简便。