[发明专利]一种指示猪体细胞克隆胚胎基因组激活程度的载体及细胞在审
申请号: | 202211456794.3 | 申请日: | 2022-11-21 |
公开(公告)号: | CN116411022A | 公开(公告)日: | 2023-07-11 |
发明(设计)人: | 苗义良;刘鑫;王婷婷;周凯;张霞 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/65;C12N15/12;C12N5/10;C12N15/877 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 李冉 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 指示 体细胞 克隆 胚胎 基因组 激活 程度 载体 细胞 | ||
1.一种指示猪体细胞克隆胚胎基因组激活程度的载体,其特征在于,该载体插入含有指示猪胚胎基因组激活程度的报告系统;
所述的报告系统含重复6次的猪PRD-Like同源域转录因子的DNA结合基序PRDL-motif,一共89bp,核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。
2.根据权利要求1所述一种指示猪体细胞克隆胚胎基因组激活程度的载体,其特征在于,报告系统还在PRDL-motif下游添加了迷你启动子、红色荧光蛋白mCherry编码框、SV40poly(A)信号以及XhoI酶切位点,上游添加了SwaI酶切位点,一共1111bp,整体核苷酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。
3.一种指示猪体细胞克隆胚胎基因组激活程度的细胞,其特征在于,该细胞基因组Rosa26位点插入有指示猪胚胎基因组激活程度的报告系统。
4.根据权利要求3所述一种指示猪体细胞克隆胚胎基因组激活程度的细胞,其特征在于,以该细胞作为供体细胞进行猪体细胞克隆胚胎的构建,得到的克隆胚胎培养72h后,在波长为587nm激发光下会发出红色荧光,荧光发光强度越强,指示猪体细胞克隆胚胎基因组激活程度越高,其发育至囊胚期的能力也越强。
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