[发明专利]用于鉴定六妹羊肚菌ZJYDJ001菌株的SSR分子标记引物组合及方法在审
申请号: | 202211465723.X | 申请日: | 2022-11-22 |
公开(公告)号: | CN115927728A | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 孙达锋;方媛;华蓉;刘绍雄;李雪松;李建英;马明;冯云利;刘春丽;尚陆娥 | 申请(专利权)人: | 中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;C12R1/645 |
代理公司: | 昆明知道专利事务所(特殊普通合伙企业) 53116 | 代理人: | 邓菁菁 |
地址: | 650032 云南省昆*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 六妹羊肚菌 zjydj001 菌株 ssr 分子 标记 引物 组合 方法 | ||
1.用于鉴定六妹羊肚菌ZJYDJ001菌株的SSR分子标记引物组合,其特征在于,所述SSR分子标记引物组合包括MSSR029,MSSR036,MSSR041,MSSR092共4对SSR分子标记引物,各引物对的核苷酸序列分别为:
MSSR029-F:AAGCCCGTGAGTTGACCTAA,
MSSR029-R:CATGCCATGTCCATTCTCAG;
MSSR036-F:ATCTGTGTCCCAACTACCGC,
MSSR036-R:AGTCCTGAGGATGCATGGAC;
MSSR041-F:TTTGTAGCACCCACCTCACA,
MSSR041-R:TATCTGGCTGTCGCTGTCAC;
MSSR092-F:TGGTGAGGTAGGTTTGGAGC,
MSSR092-R:AGGTGGTGATCAATGAAGGC。
2.一种基于权利要求1所述SSR分子标记引物组合鉴定六妹羊肚菌ZJYDJ001菌株的方法,其特征在于,按以下步骤实现:
1)DNA提取:提取待检测六妹羊肚菌菌株的菌丝体基因组DNA;
2)SSR分子标记的扩增:采用权利要求1的SSR分子标记引物组合提取的DNA进行PCR扩增;
3)荧光毛细管电泳检测分析:将步骤2)扩增好的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测并拍摄胶图,通过胶图确定模板浓度,加水稀释到毛细管电泳所需浓度,进行荧光毛细管电泳检测,比对荧光峰图,即可鉴定出六妹羊肚菌ZJYDJ001菌株。
3.根据权利要求2所述SSR分子标记引物组合鉴定六妹羊肚菌ZJYDJ001菌株的方法,其特征在于,菌丝体基因组DNA提取的方法如下:
A、将待检测六妹羊肚菌菌株转接到马铃薯葡萄糖琼脂固体培养基上,20℃培养10-14d后收集菌丝;
B、使用AxyPrep基因组DNA小量试剂盒提取上述菌丝的基因组DNA,紫外分光光度法检测总基因组DNA浓度和质量即可。
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