[发明专利]抗病原菌的牛源解淀粉芽孢杆菌的制备方法在审
申请号: | 202211473547.4 | 申请日: | 2022-11-22 |
公开(公告)号: | CN115948282A | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
发明(设计)人: | 胡圣伟;倪伟;王婷;李村院;李晓悦 | 申请(专利权)人: | 石河子大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/02;A23K10/18;A61K35/742;A61P31/04;C12R1/07 |
代理公司: | 乌鲁木齐恒智专利商标代理事务所(普通合伙) 65102 | 代理人: | 李靖 |
地址: | 832000 新疆维吾尔*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗病 牛源解 淀粉 芽孢 杆菌 制备 方法 | ||
1.一种抗病原菌的牛源解淀粉芽孢杆菌的制备方法,其特征在于:包含以下步骤:
A、样品采集:采集牛新鲜粪便,无菌试管密封包装4℃低温运至实验室;
B、样品预处理:将A步骤得到的新鲜牛粪便使用5g±1g置于无菌的50mL离心管中,置于20℃保存;
C、菌株的分离与纯化:对B步骤预处理后的样品,取1mL稀释液于装有9mL无菌生理盐水的试管中进行稀释,10-2~10-8各1mL于溴甲酚绿固体筛选培养基中,进行稀释涂布培养,待凝固后置于37℃培养箱恒温培养48~72h;挑取溴甲酚绿固体筛选培养基中菌落边缘变黄的菌落于液体培养中进行培养;反复进行分离纯化2~3次后,挑取在筛选养基中有生长特征的菌落进行分离纯化,得到目标菌种。
2.根据权利要求1所述的一种抗病原菌的牛源解淀粉芽孢杆菌的制备方法,其特征在于:所述溴甲酚绿固体筛选培养基(1000mL)由牛肉膏5g,蛋白胨5g,葡萄糖20g,NaCI 5g,溴甲酚绿0.1g,琼脂20g和余量的蒸馏水组成,调节pH 6.8-7.2,于121℃高温高压灭菌20min得到。
3.根据权利要求1所述的一种抗病原菌的牛源解淀粉芽孢杆菌的制备方法,其特征在于:C步骤得到的目标菌种和50%甘油以1:1混匀后置于-20℃保存或-80℃长期保存,保存后的菌种可以用于后续验证试验。
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