[发明专利]一种基于丹磺酰化及液相色谱质谱联用的白酒中二肽定量方法

说明书

本申请涉及白酒检测技术领域，具体涉及一种基于丹磺酰化及液相色谱质谱联用的白酒中二肽定量方法，包括以下步骤：(1)取白酒样品，将所述白酒样品进行浓缩后得到浓缩样品；(2)量取所述浓缩样品得到待测样品，向所述待测样品中加入内标物，干燥后加入丹磺酰氯乙腈溶液，再调节pH值后进行衍生化反应，反应结束后加入混合液体，混合均匀后离心，取上清液得到待测液体；所述混合液体包括丹磺酰氯乙腈溶液、pH值缓冲溶液以及盐酸；(3)将所述待测液体送入液相色谱质谱联用仪中进行检测，根据检测结果对二肽进行定性定量分析。本申请能够更加准确的对白酒中二肽进行定量检测。

技术领域

本申请涉及白酒检测技术领域，尤其是涉及一种基于丹磺酰化及液相色谱质谱联用的白酒中二肽定量方法。

背景技术

二肽类物质对酒类饮料的风味有关键贡献，对二肽化合物的定性、定量分析有助于酒类产品风味的全面解析，并进一步对酒类产品风味进行改善和调控。

目前，现有技术中有利用商品化的6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯衍生化试剂盒对清酒中的二肽进行定量的方法，但是该方法利用水进行标准曲线溶液的配制，忽略了基质效应对分析物响应的影响，进而影响定量结果的真实性和可靠性。此外，由于酒类样本中的二肽含量很少，在检测时需要对酒样进行浓缩，酒类样本高倍浓缩后含羧酸类物质浓度增高，会对衍生化反应的pH值产生影响，导致衍生化效率降低从而影响结果的可靠性。而且标准曲线溶液和酒类样本基质不同，也会影响定量结果的真实性和准确性。

基于此，如何建立一种具有较低检测限、准确、可靠的检测方法用于检测酒类样本中的二肽，成为亟需解决的问题。

发明内容

为了解决上述问题，本申请提供一种基于丹磺酰化及液相色谱质谱联用的白酒中二肽定量方法。

本申请提供的一种基于丹磺酰化及液相色谱质谱联用的白酒中二肽定量方法采用如下的技术方案：

一种基于丹磺酰化及液相色谱质谱联用的白酒中二肽定量方法，包括以下步骤：

(1)取白酒样品，将所述白酒样品进行浓缩后得到浓缩样品；

(2)量取所述浓缩样品得到待测样品，向所述待测样品中加入内标物，干燥后加入丹磺酰氯乙腈溶液，再调节pH值后进行衍生化反应，反应结束后加入混合液体，混合均匀后离心，取上清液得到待测液体；

所述混合液体包括丹磺酰氯乙腈溶液、pH值缓冲溶液以及盐酸；

(3)将所述待测液体送入液相色谱质谱联用仪中进行检测，根据检测结果对二肽进行定性定量分析。

优选地，所述步骤(1)包括：取80～120mL所述白酒样品，将所述白酒样品浓缩20～30倍后得到浓缩样品；

优选地，所述步骤(1)包括：取100mL所述白酒样品，将所述白酒样品进行蒸发浓缩25倍后得到浓缩样品；

优选地，将所述白酒样品在35～45℃下旋转蒸发浓缩25倍后得到浓缩样品；

更优选地，将所述白酒样品在40℃下旋转蒸发浓缩25倍后得到浓缩样品。

优选地，所述步骤(2)包括：量取18～22μL所述浓缩样品得到待测样品，向所述待测样品中加入9～11μL的内标物，冷冻干燥后加入8～12μL丹磺酰氯乙腈溶液，涡旋1～3min后加入8～12μL的pH值为9的缓冲溶液，涡旋1～3min后加入碱性溶液调节pH值后进行衍生化反应，反应结束后加入混合液体，混合均匀后离心，取上清液得到待测液体；

优选地，所述步骤(2)包括：量取20μL所述浓缩样品得到待测样品，向所述待测样品中加入10μL的内标物，冷冻干燥后加入10μL丹磺酰氯乙腈溶液，涡旋2min后加入10μL的pH值为9的缓冲溶液，涡旋2min后加入碱性溶液调节pH值后进行衍生化反应，反应结束后加入混合液体，混合均匀后离心，取上清液得到待测液体；