[发明专利]一种单克隆抗体及其用途

说明书

本发明公开了一种单克隆抗体及其用途。所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，其特征在于，所述单克隆抗体包括如下技术特征中的一个或多个：重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.20所示的CDR‑H1；重链可变区包括氨基酸序列如SEQ IDNo.2或SEQ ID No.21所示的CDR‑H2；重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.3或SEQ IDNo.22所示的CDR‑H3。本申请得到的单克隆抗体对柯萨奇病毒A16病毒具有高特异性、高灵敏度、高效价等特性，能用于CV A16病毒疫苗的研发、生产和质检环节。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种单克隆抗体及其用途。

背景技术

手足口病(hand，foot and mouth disease，HFMD)是由肠道病毒引起的传染病，肠道病毒包括20多种类型，主要是肠道病毒71型(Enterovirus A71,EV A71)柯萨奇病毒(Coxsackievirus,CV)(CV A16、CV A6和CV A10)，其中由CV A16和EV A71感染所致的HFMD最为常见，并呈现交替流行，共同感染的趋势。HFMD主要感染人群为5岁以下的婴幼儿，其临床症状常见手、足、口部皮疹、疱疹；大部分患儿病情较轻且具有自限性，但也可能导致少数儿童出现心肌炎、肺水肿、无菌脑膜炎等并发症，其中重症病例可能出现病情迅速发展，甚至导致死亡。鉴于HFMD传播范围广且危害较大，对儿童生命健康造成严重威胁，我国于2008年将其列为丙类传染病。CV A16作为主要治病病原体之一，严重危害儿童的生命健康，CVA16感染导致严重病例及死亡病例也逐渐增多。1957年，加拿大首次报道了CV A16引起HFMD的暴发。其后，CV A16感染所致的HFMD病例呈全球性分布，美国、法国、中国、日本等国均报道过CV A16的暴发和流行，且大多发生于夏、秋两季。

CV A16属于小核糖核酸病毒科肠道病毒属，病毒颗粒呈20面体立体对称的球形结构，直径23～30nm，由内部核酸和衣壳蛋白质组成，无脂质包膜。CV A16外壳蛋白由VP1、VP2、VP3和VP4组成，其中VP1为最重要的抗原决定簇。由CV A16感染引起的严重手足口病患者表现为心肌炎和肺炎；CV A16引起的手足口病患儿发病年龄更低、发热病程短、更易出现白细胞升高。不同病毒感染引起的手足口病发病机制不同，这意味着对不同病毒引起的HFMD应制定不同的治疗策略。目前，国内已有3家公司的EV A71型灭活疫苗批准上市，而这些EV A71疫苗对CV A16无交叉保护作用，不能对由其他病原体引起的HFMD起到预防保护作用。CVA16作为引起HFMD主要病原体之一，其疫苗的研究进展仍较缓慢，缺乏有效的预防及治疗手段。

单克隆抗体(Monoclonal antibody,MAb)由于靶向性高、低毒性等特点，是研究现代生命科学研究的重要工具，其不仅可应用于临床诊断及治疗，更是开展保护性位点、发病机制等基础研究的有利手段。此外，杂交瘤技术及基因工程技术的应用，使单克隆抗体可大量生产及人源化，并得到越来越广泛的应用。目前，关于CV A16单抗的研究少有报道。因此，开展CV A16单抗的研究对CV A16基础研究、CV A16诊断及治疗，疫苗的研发与评价具有重要意义。本研究以CV A16 VLP作为免疫原制备了能特异性识别CV A16的中和性单克隆抗体。通过Elisa、SDS-PAGE、western blot等方法，说明单抗可用于灵敏检测和分析CV A16，可在病毒感染的诊断和疫苗开发的研究中存在巨大潜力。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种单克隆抗体及其用途，以期解决现有技术中存在的问题。

本发明的第一方面保护一种单克隆抗体，包括重链可变区和轻链可变区，所述单克隆抗体包括如下技术特征中的一个或多个：

重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.20所示的CDR-H1；

重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.2或SEQ ID No.21所示的CDR-H2；