[发明专利]一种游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒

权利要求书

1.一种游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：包括包被有游离β人绒毛膜性腺激素单克隆抗体的磁微粒混悬液、游离β人绒毛膜促性腺激素系列校准品、酶结合物。

2.根据权利要求1所述的游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：所述包被有游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的磁微粒混悬液中磁微粒的粒径为0.9 μm-1.8μm，且磁微粒的表面含有羧基活性基团，其制备方法如下：

用PBS缓冲液洗涤磁微粒原液，弃上清，用EDC和N-羟基琥珀酰亚胺对磁微粒活化，使羧基基团暴露出来；用PBS缓冲液洗涤活化后的磁微粒；再加入适量的PBS缓冲液将磁微粒悬浮，然后加入游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体，室温震荡2 h；用封闭液封闭5次，封闭后的磁珠2-8℃保存。

3.根据权利要求1所述的游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：所述游离β人绒毛膜促性腺激素系列校准品采用含有0.1% BSA和0.9% NaCl的0.5M Tris-HCl缓冲液进行配制，其中游离β人绒毛膜促性腺激素的浓度梯度为0 ng/mL、2 ng/mL、5 ng/mL、20ng/mL、100 ng/mL和300 ng/mL。

4.根据权利要求1所述的游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：所述酶结合物为发光标记物标记的游离β人绒毛膜性腺激素单克隆抗体，其制备方法如下：

用交联剂对游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体进行活化处理；利用0.06M NaIO₄溶液对发光标记物进行活化处理；将活化后的游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体和发光标记物偶联在一起，最后加入封闭试剂进行封闭。

5.根据权利要求2所述的游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：所述游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体和磁微粒的质量比为1:(10-50)。

6.根据权利要求2所述的游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：所述封闭液为含有1% BSA、1.5% EDTA、0.2%叠氮化钠、0.1% ProClin300、0.1% BB2的0.05M BIS-TRIS-Propane缓冲溶液。

7.根据权利要求4所述的游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：所述用交联剂对游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体进行活化处理中的交联剂为SPDP溶液，且游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体和交联剂的质量比为100:(0.5～2.0)。

8.根据权利要求7所述的游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：所述利用0.06M NaIO₄溶液对发光标记物进行活化处理具体为：向发光标记物中加入0.5mL 0.06MNaIO₄溶液置于2～8℃反应30 min，然后用醋酸钠缓冲液进行透析，置于4℃过夜。

9.根据权利要求8所述的游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：所述活化后的游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体和发光标记物偶联在一起，具体为：向活化后的发光标记物中加入活化后的游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体，加入PBS缓冲液继续搅拌透析，使抗体和发光标记物充分结合；然后加入NaBH₄溶液，混匀后静置2h，最后加入饱和硫酸铵溶液，静置30min，离心，得到游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体-发光标记物沉淀。

10.根据权利要求4、7-9任一项所述的游离β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，其特征在于：所述酶结合物的制备方法中，在偶联之后和封闭之前还包括脱盐处理：向游离β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体-发光标记物中加入PBS溶液，透析过夜。