[发明专利]一种盐酸青藤碱药材、中间体、原料药的指纹图谱检测方法

说明书

本发明公开了一种盐酸青藤碱注射液药材、中间体和盐酸青藤碱原料药的指纹图谱检测方法，该方法具体为：(1)制备供试品溶液；(2)采用高效液相色谱仪对步骤(1)制备的溶液进行分析测定；(3)计算不同批次青风藤药材、盐酸青藤碱生产中间体、盐酸青藤碱原料药的相似度。本发明为盐酸青藤碱注射液药材、中间体和盐酸青藤碱原料药的质量控制提供了科学依据和技术支持。本发明方法可以填补现有分析方法对生产中间体检测方法的空白，全面提升盐酸青藤碱注射液质量的控制水平。

技术领域

本发明涉及一种中药的检测方法，具体涉及盐酸青藤碱注射液原料、中间体的指纹图谱检测方法。

背景技术

盐酸青藤碱是由青风藤药材通过渗漉、碱化、萃取、结晶等工艺精制而成，以盐酸青藤碱为原料制成的制剂有正清风痛宁片、缓释片、注射液，具有祛风除湿、活血通络，消肿止痛的作用，临床上用于治疗肌肉酸痛、关节肿胀、疼痛，屈伸不利，麻木僵硬及风湿与类风湿性关节炎具有上述证候者。盐酸青藤碱工业生产中的重要中间体包括渗漉液、碱化液和萃取液。目前有报道采用高效液相色谱法测定青风藤药材、原料药和制剂中盐酸青藤碱含量用于质量控制。但是分析方法总体关注盐酸青藤碱较多，对于除盐酸青藤碱之外的其他成分关注较少；对于药材、原料药和制剂关注较多，对于生产中间体关注较少。

指纹图谱是评价中药的有效方法，采用适当数学方法处理指纹图谱的光谱或者色谱峰信息，就可以得到相似度数值，从而能整体评价中药药材、中间体或制剂质量。指纹图谱中的色谱峰面积大小也可以用于反映中药在生产中的量值传递规律。

目前未见对于盐酸青藤碱生产过程中间体和注射液的指纹图谱方法研究报道。所以有必要研发能应用于生产过程全程质量检测，也能体现除青藤碱以外其他成分在制药过程中传递的指纹图谱方法。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种盐酸青藤碱全过程指纹图谱检测方法，包括但不限于青风藤药材、盐酸青藤碱及其中间体成分的指纹图谱检测方法，为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种盐酸青藤碱全过程指纹图谱检测方法，该方法包括原料、中间体的指纹图谱检测；所述指纹图谱检测依次包括供试品溶液的制备、指纹图谱检测条件、典型指纹图谱确定的步骤；

本发明盐酸青藤碱注射液全过程指纹图谱检测方法所述的对照品溶液的制备：

精密称定青藤碱对照品置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度线，摇匀，制成0.5mg/mL的对照品溶液，离心取上清液即得。

本发明盐酸青藤碱注射液全过程指纹图谱检测方法所述的指纹图谱检测为：

色谱条件为：色谱柱：Agilent Infinity Lab Poroshell HPH-C18色谱柱(4.6mm×100mm，2.7μm)；以1.0mmol/L甲酸铵的水溶液(氨水调至pH＝10.1)为A相，1.0mmol/L甲酸铵的80％乙腈溶液(加入与A相等量氨水)为B相。梯度洗脱，洗脱方式为0-5min，10％ B-21％ B；5-12min，21％ B-25％ B；12-34min，25％ B-30％ B；34-37min，30％ B-50％ B；37-40min，50％ B-70％ B。流量：0.70mL/min；柱温：36℃；进样量：20.0μL；检测波长：210nm；后运行时间10min。

以上对照品溶液的制备、指纹图谱检测条件适用于本发明盐酸青藤碱注射液全过程6种被检测物的检测。

进一步的，青风藤药材的指纹图谱检测方法为：

供试品溶液的制备

参照2020版《中国药典》青风藤条目下供试品溶液制备方法获得青风藤药材提取液；在指纹图谱检测方法下对青风藤药材提取液进行分析；进样前进行供试品溶液的制备，移取1mL-10ml青风藤药材提取液蒸干，甲醇复溶，移至10mL容量瓶，使用纯甲醇稀释定容至刻度线，充分混匀后离心取上清液，即得供试品溶液；