[发明专利]一种胞外多糖及其制备方法和用途在审
申请号: | 202211499579.1 | 申请日: | 2022-11-28 |
公开(公告)号: | CN116121319A | 公开(公告)日: | 2023-05-16 |
发明(设计)人: | 李丽妍;兰翀;黄涛;马云阁;李应岩 | 申请(专利权)人: | 黄河科技学院 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C08B37/00;A61K31/715;A61K36/062;A61P3/10;C12R1/645 |
代理公司: | 郑州豫原知识产权代理事务所(普通合伙) 41176 | 代理人: | 吴小传 |
地址: | 450063 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多糖 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种胞外多糖,其特征在于,所述胞外多糖是由围小丛壳菌株HY3-1发酵产生的;所述菌株HY3-1保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC M 20221289。
2.根据权利要求1所述的胞外多糖,其特征在于,所述胞外多糖的组分包含甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖,所述甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯的摩尔比为0.35:2.52:91.77:2.39:2.98。
3.一种权利要求1所述胞外多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将所述菌株HY3-1接种至发酵培养基中,26~30℃下150~180rpm培养4~5d,获得含有所述胞外多糖的发酵液;
其中,所述发酵培养基按重量份数计由以下原料制成:土豆15~25份、蔗糖1~3份、NH4Cl 0.8~1份、KH2PO4 0.08~0.1份、MgSO4 0.08~0.1份、蒸馏水70~85份;
将含有所述胞外多糖的发酵液在4℃下、3000~4000rpm离心8~10min,收集上清液,减压浓缩,得到发酵浓缩液;
向所述发酵浓缩液中加入3~5倍体积的无水乙醇溶液,静置后离心,收集沉淀,所得沉淀冷冻干燥后得到胞外多糖。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述减压浓缩是在40℃、0.07~0.08MPa下将所述上清液浓缩至原体积的1/5~1/4,所述冷冻干燥是在-20~-40℃、0.01Pa真空条件下进行。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,还包括以下步骤:
将胞外多糖水溶液经阴离子交换柱进行梯度洗脱,洗脱溶剂依次为pH为5.5的0.05MTris-HCL缓冲液及0.3M NaCl溶液,收集洗脱液,得到初步纯化产物;
将所述初步纯化产物透析除盐,透析得到的洗脱液依次减压蒸馏、浓缩、冷冻干燥,即得所述胞外多糖纯品。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,
浓度为1mg/mL所述胞外多糖粗品水溶液与所述0.05M Tris-HCl缓冲液、0.3M NaCl溶液的体积比为0.1∶80∶80;
所述阴离子交换柱为Q Sepharose Fast Flow柱,所述透析是使用截留孔径为300Da的透析袋进行;
所述减压蒸馏是将透析得到的洗脱液在40℃、0.07~0.08MPa下浓缩至原体积的1/20~1/30,所述冷冻干燥是在0.01Pa、-20~-40℃下进行。
7.一种权利要求1所述胞外多糖在制备降血糖药物中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述胞外多糖用于制备α-葡萄糖苷酶抑制剂。
9.一种降血糖的药物,其特征在于,其包括权利要求1所述胞外多糖,以及药学上可接受的辅料或载体。
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