[发明专利]用于检测PEDV的免疫生物传感器及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202211593324.1 | 申请日： | 2022-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN115656304B | 公开（公告）日： | 2023-03-10 |
| 发明（设计）人： | 李智丽;罗宇杭;郭锦玥;温锋;池仕红;马广邈;黄宗洋;苏朗驹 | 申请（专利权）人： | 佛山科学技术学院 |
| 主分类号： | G01N27/48 | 分类号： | G01N27/48;G01N33/531;G01N33/569;G01N27/327;C01B32/198 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 许英伟 |
| 地址： | 528000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 pedv 免疫 生物 传感器 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于检测PEDV的免疫生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
制备氧化石墨烯层：通过电化学还原法使氧化石墨烯沉积于电极基材表面，形成氧化石墨烯层；所述电化学还原法包括以下步骤：将电极基材浸泡于氧化石墨烯分散液中，pH为5.8-6.4，采用循环伏安法以80-120mV/S的扫描速率在-1.5V-0.3V的电位区间内扫描25-35圈；
制备壳聚糖层：通过电化学沉积法使壳聚糖沉积于所述氧化石墨烯层表面，形成壳聚糖层；所述电化学沉积法包括以下步骤：将修饰了氧化石墨烯的电极基材浸泡于壳聚糖溶液中，采用计时电流法以（-3V）-（-2V）的电位进行沉积250-350s；
制备猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层：将电极基材在N-羟基琥珀酰亚胺和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的混合溶液中浸泡40-60min；将猪流行性腹泻病毒单克隆抗体滴涂至壳聚糖层表面，孵育，形成猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层；将修饰了猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层的电极基材与牛血清蛋白孵育，形成牛血清蛋白封闭层；得到用于检测PEDV的免疫生物传感器。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述免疫生物传感器包括电极基材、氧化石墨烯层、壳聚糖层、猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层，以及覆盖于所述猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层表面的牛血清蛋白封闭层；所述氧化石墨烯层、所述壳聚糖层、所述猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层依次层叠覆盖于所述电极基材；
所述电极基材为玻碳电极。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述N-羟基琥珀酰亚胺和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的混合溶液中，所述N-羟基琥珀酰亚胺与所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的摩尔比为1:4；所述电极基材为玻碳电极。
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