[发明专利]一种鹿角脱盘蛋白及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种鹿角脱盘蛋白，所述蛋白的二级结构为：α‑螺旋14.64％、β‑折叠47.65％、β‑转角24.43％和无规则卷曲结构13.28％，本发明得到鹿角脱盘蛋白化学结构并结合蛋白质组学加以鉴定，并填补了其抗乳腺增生应用研究的空白，对鹿角脱盘蛋白的开发及临床应用奠定实验基础与理论依据，同时也将促进鹿角脱盘产业的发展，开拓其较为广阔的市场前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鹿角脱盘蛋白的制备方法及应用。

背景技术

鹿角脱盘，俗称鹿角盘、鹿花盘和鹿角帽，为鹿科动物马鹿Cervus elaphusLinnaeus或梅花鹿Cervus Nippon Temminck已骨化的角或锯茸后翌年春季脱落的角基。根据药典中所记载，鹿角脱盘性温，味咸，肾、肝经，具有温肾阳，强筋骨，行血消肿之功效，常用于肾阳不足，腰脊冷痛，阴疽疮疡，乳痈初起，瘀血肿痛等病症的治疗。

鹿角脱盘是一种富含多种成分及药理活性的动物中药材，现代药理学研究表明鹿角脱盘具有治疗乳腺增生、乳腺炎、抗氧化、抗疲劳、抗癌、抗炎镇痛、调节免疫、抑菌等药理作用。其成分包括蛋白质多肽、氨基酸、胆固醇、脂类、无机物与矿物质等，其中水溶性蛋白质、肽类物质是其主要活性成分，不仅含量相对较多，且具有丰富的药用价值。

近年来，乳腺疾病已成为危害亚洲女性健康的第一杀手，多数女性均不同程度地受到乳房胀、痛甚至乳腺增生的困扰。乳腺增生主要临床表现为乳房肿块和胀痛，是一种非炎症的增生性病变。从组织学表现看：其为乳腺组织增生及退行性病变，与内分泌功能紊乱密切相关。乳腺增生在传统中医学上归属于“乳癖”范畴，多由思虑、忧郁、劳累过度、贪食冷饮等外因致体内气机不畅、气血互换停滞、积聚于乳房，导致乳络堵塞、聚结成核。

在过去的几十年里，人们大多只关注鹿茸、鹿鞭等鹿副产品的营养成分和药用价值，忽视鹿角脱盘这一具有广阔市场前景的动物中药材，而相对于鹿角脱盘蛋白的研究则甚少。近年来，虽已有学者从鹿角脱盘中分离得到具有生物活性的蛋白质或多肽成分，并通过药理实验验证其具有不同功效，也有十味香鹿胶囊、岩鹿乳康胶囊、丹鹿胶囊等含有鹿角脱盘成分，用于治疗乳腺增生的复方中成药面世，但其有效作用部位及药效物质基础尚未明确。

因此，如何提供一种作用明确、药效好的的鹿角脱盘蛋白是亟需解决的一个问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种鹿角脱盘蛋白及其制备方法与应用，得到鹿角脱盘蛋白化学结构并结合蛋白质组学加以鉴定，并填补了其抗乳腺增生应用研究的空白，对鹿角脱盘蛋白的开发及临床应用奠定实验基础与理论依据，同时也将促进鹿角脱盘产业的发展，开拓其较为广阔的市场前景。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种鹿角脱盘蛋白，所述蛋白的二级结构为：α-螺旋14.64％、β-折叠47.65％、β-转角24.43％、无规则卷曲结构13.28％。

优选的，所述蛋白的分子量为65.5kDa。

优选的，所述蛋白包括特异性肽段序列GSGGGSSGGSIGGR的高置信度蛋白KRT1。

根据上述所述的鹿角脱盘蛋白在制备抗乳腺增生药物中的应用。

上述一种鹿角脱盘蛋白的制备方法，包括以下具体步骤：

(1)对鹿角脱盘的水提物通过硫酸铵结合等电点处理后，得到鹿角脱盘蛋白粗提物；

(2)将所述鹿角脱盘蛋白粗提物依次进行离子交换层析和凝胶过滤层析进行纯化后，得到鹿角脱盘蛋白。

优选的，步骤(1)中所述水提取的具体步骤为：在鹿角脱盘粉末加入料液比为1:25的蒸馏水，加热至52℃，磁力搅拌2.9h，连续提取两次，合并其上清液即为水提物。