[发明专利]一种利培酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用在审
申请号: | 202211605955.0 | 申请日: | 2022-12-14 |
公开(公告)号: | CN116003404A | 公开(公告)日: | 2023-04-25 |
发明(设计)人: | 王镇;王凌志;饶颖 | 申请(专利权)人: | 杭州同舟生物技术有限公司 |
主分类号: | C07D471/04 | 分类号: | C07D471/04;C07K14/765;C07K16/44;G01N33/53 |
代理公司: | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人: | 黎双华 |
地址: | 310018 浙江省杭州市江干区经*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利培酮 人工 半抗原 抗原 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种利培酮人工半抗原,其特征在于,其分子结构式如Ⅰ所示:
2.如权利要求1所述的利培酮人工半抗原的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)7-羟基利培酮和碳酸钾、对溴甲基苯甲酸甲酯进行取代反应,制得式A所示化合物;
(2)式A所示化合物和碱溶液进行水解反应,再调节pH值至酸性,制得式I所示的利培酮半抗原;
所述方法的反应式如下所示:
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述步骤(1)中,7-羟基利培酮、碳酸钾、对溴甲基苯甲酸甲酯的物质的量之比为1:2~3:2~2.5;
反应温度为60~70℃,反应时间为15~20小时;
所述步骤(2)中,碱溶液为NaOH水溶液。
4.一种利培酮人工抗原,其特征在于,其分子结构式如II所示:
式II中,BSA为牛血清白蛋白。
5.权利要求4所述的利培酮人工抗原的制备方法,其特征在于,所述方法为:将式I所示的利培酮人工半抗原与牛血清白蛋白通过活泼酯法结合,制得式II所示的利培酮人工抗原。
6.如权利要求5所述的利培酮人工抗原的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(a)将式I所示的利培酮人工半抗原与N-羟基琥珀酰亚胺、N,N'-二环己基碳二亚胺按物质的量之比为1∶(1.2~1.5)∶(1.2~1.5)溶解于N,N-二甲基甲酰胺溶剂中,室温搅拌反应18~20小时,反应结束后离心取上清液;
(b)将步骤(a)的上清液滴加到牛血清白蛋白溶液中,混匀后将所得混合液置于4℃下静置过夜,经透析、离心取上清液,制得所述式II所示的利培酮人工抗原。
7.如权利要求6所述的利培酮人工抗原的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,所述牛血清白蛋白溶液的浓度为10mg/mL,步骤(a)的上清液与牛血清白蛋白溶液的体积比为1∶10。
8.如权利要求1所述的利培酮半抗原或者权利要求4所述的利培酮人工抗原在制备抗利培酮抗体中的应用。
9.一种抗利培酮抗体,其特征在于,所述抗利培酮抗体是由权利要求4所述的利培酮人工抗原经动物免疫得到的、可与利培酮发生特异性免疫反应的球蛋白。
10.如权利要求9所述的抗利培酮抗体在检测利培酮中的应用。
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