[发明专利]一种利培酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种新型的利培酮人工半抗原和人工抗原及其制备方法。利培酮人工半抗原的分子结构式如式Ⅰ，利培酮人工抗原的分子结构式如式Ⅱ。本发明还公开了利培酮人工抗原在制备抗利培酮抗体中的应用。本发明的利培酮人工半抗原最大程度地保留了利培酮的特征结构，且经过化学修饰具有可以与载体蛋白发生偶联的活性基团，可获得利培酮人工抗原；进一步制备获得的利培酮人工抗原可免疫获得亲和力高、灵敏度高、特异性强、效价高的抗利培酮抗体；该抗原抗体可用于免疫层析技术，具有灵敏度高、特异性强、易于操作、经济快速等优点，可用于利培酮的定量或半定量检测。

技术领域

本发明属于生物化工技术领域，具体涉及一种利培酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用。

背景技术

利培酮(Risperidone)，为苯并异恶唑衍生物，是新一代的抗精神病药，因其治疗窗宽且可以与其他药物合并用药，受到市场的广泛认可，成为治疗精神分裂症的常规药物之一。但是随着该药的推广，它的毒副作用也引起了人们的关注。常见不良反应有：失眠、焦虑、头痛、头晕、口干。较少见的不良反应有：嗜睡、疲劳、注意力下降、便秘、消化不良、恶心、呕吐、腹痛、视物模糊、阴茎异常勃起、勃起困难、射精无力、性淡漠、尿失禁、鼻炎、皮疹以及其它过敏反应。

从该药上市以来，随着该药的推广，对于利培酮所致不良反应的报导也层出不穷，因此对该药的检测也越来越多。所以开发一种快速、简便、经济的检测方法也显得尤为重要。

目前，对利培酮的检测主要依靠气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、液相色谱四级杆飞行时间质谱仪(Q-TOFLC/MS)、核磁共振氢谱(HNMR)、核磁共振碳谱(13CNMR)、核磁共振氟谱(19FNMR)、红外光谱(IR)等方法，但都存在仪器昂贵，检测费时，并且需要专业技术人员进行操作的缺点，不能达到现代检测对快速、准确的要求。

采用免疫层析试纸快速检测技术则可以弥补以上所有缺点，该技术具有特异性强、灵敏度高、简便、经济等特点。它不需要专业技能和昂贵复杂的仪器设备即可实现对抗原、半抗原、抗体等各种分析物的定性和半定量检测。它广泛应用于激素、肿瘤标记物、兽药、农药、毒品等物质的检测。

现有技术中的利培酮人工半抗原一般在9位或者N、O、F原子位置进行衍生，影响利培酮的活性位点，专一性较差。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷与不足，提供一种利培酮人工半抗原和利培酮-牛血清白蛋白人工抗原的制备方法，所制备的利培酮-牛血清白蛋白人工抗原可进行动物免疫，取得相应的利培酮抗体，可用于各种利培酮类免疫分析法的研究，为利培酮的检测提供更加方便、快速、准确的途径。

为实现上述技术目的，本发明通过以下技术方案实现：

本发明的第一个目的是提供一种利培酮人工半抗原，其分子结构式如式Ⅰ所示：

本发明提供的利培酮人工半抗原在7位羟基处进行衍生，最大程度的保留了利培酮的特征结构，且经过化学修饰产生了与载体蛋白偶联的活性基团。

本发明第二个目的在于提供所述利培酮人工半抗原的制备方法，所述方法包括以下步骤：

(1)7-羟基利培酮和碳酸钾、对溴甲基苯甲酸甲酯进行取代反应，制得式A所示化合物；

(2)式A所示化合物和碱溶液进行水解反应，再调节pH值至酸性，制得式I所示的利培酮半抗原；

所述方法的反应式如下所示：

所述步骤(1)中，7-羟基利培酮、碳酸钾、对溴甲基苯甲酸甲酯的物质的量之比为1:2～3:2～2.5；

反应温度为60～70℃，反应时间为15～20小时；