[发明专利]一种提高内源酶分泌的基因工程菌及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 202211613448.1 | 申请日： | 2022-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN115976094A | 公开（公告）日： | 2023-04-18 |
| 发明（设计）人： | 郎绪业;李舟阳 | 申请（专利权）人： | 浙江大学杭州国际科创中心 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N9/24;C12N15/31;C12N1/19;C12R1/645 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 韩聪 |
| 地址： | 311200 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 内源 分泌 基因工程 及其 构建 方法 应用 | ||
1.核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的Km_10019基因在促进马克思克鲁维酵母内源酶分泌中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述Km_10019基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括：以马克思克鲁维酵母为出发菌，利用生物学技术手段在基因组中插入含有Km_10019基因的过表达模块或者在宿主菌中导入含有Km_10019基因的重组表达质粒，获得功能性获得的基因工程菌。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，重组表达质粒的原始质粒为pIW1146载体。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述基因工程菌采用SD培养基进行发酵培养。
6.一种提高内源酶分泌的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌以马克思克鲁维酵母为出发菌，基因工程菌中具有包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的Km_10019基因的过表达模块。
7.如权利要求6所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌中含有包含Km_10019基因的重组表达质粒，所述重组表达质粒的原始载体为pIW1146载体，所述Km_10019基因替换了原始载体中的GFP基因。
8.如权利要求6所述的基因工程菌的构建方法，其特征在于，包括：以马克思克鲁维酵母为出发菌，利用生物学技术手段在基因组中插入含有Km_10019基因的过表达模块或者在宿主菌中导入含有Km_10019基因的重组表达质粒。
9.如权利要求6或7所述的基因工程菌在制备多聚半乳糖醛酸酶制剂中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述应用包括：将扩大培养后的基因工程菌接种于SD液体培养基中发酵培养，收集发酵液，从发酵液中分离获得多聚半乳糖醛酸酶。
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