[发明专利]一种抗人CD137抗体、核酸分子及应用

说明书

本发明公开了一种抗人CD137抗体、核酸分子及应用，涉及生物医药技术领域。该抗体可交叉结合猴CD137，表现出偏弱的协同刺激T细胞刺激的活性，该克隆命名为BXME8，具有独特的可变区序列，其对CD137分子的天然配受体结合有封阻活性，为“封阻型”抗体。本发明实现了全抗体真核表达、纯化批量制备，抗体可用于人或猴CD137检测，在功能上表现出较为温和的协同刺激T细胞活化、增殖，显示出对CD8+T细胞的选择扩增作用，基于该抗体的全长序列可以实施进一步的工程化改造、表达和应用，具有潜在的体内外适宜免疫调节活性。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及一种抗人CD137抗体、核酸分子及应用。

背景技术

肿瘤的免疫治疗获得突破进展，T细胞是主要效应细胞，近几年来以PD-1抗体为代表的T细胞免疫调节抗体快速进入临床，广谱用于肿瘤治疗，但有效人群比例较低，在最大适应症肺癌有效率约为18％。联合免疫治疗是提高疗效的发展方向，包括PD-1抗体联合化疗、放疗、抗血管生成药物和联合治疗策略，此对于扩大收益人群，延长病人存活、甚至治愈肿瘤具有现实意义，也是国际公认的研究方向。

1993年Kwon首先从CD8+T细胞克隆出了4-1BB(CD137)，具有协同刺激T细胞作用，随后报道了CD137抗体体内具有调节免疫、根除小鼠肿瘤移植模型效能，随后临床前系列抗肿瘤治疗研究中显现了该靶点抗体优异的抗肿瘤活性，包括低免疫原性肿瘤。CD137分子调控因此成为最受关注的抗肿瘤免疫调控靶点之一。CD137是一个经典的T细胞协同活化分子，呈抗原诱导性表达，特别是偏于CD8+T细胞表达，其调控有助于CD8+T细胞存活，促进记忆T细胞分化，CD8+T细胞是抗肿瘤的核心效应细胞。CD137分子被引入嵌合抗原受体T细胞(CAR-T cells,Chimeric Antigen Receptor T-Cells)被认为是迄今CAR-T细胞的最佳调节分子，也显示出该分子对肿瘤免疫调控治疗具有重要意义。CD137一直以来是受到高度关注的免疫调节点，包括肿瘤和某些自身免疫病治疗潜力，其抗体调节制剂是最主要的应用形式。

Urelumab是第一个准入临床的CD137抗体，充分表现出高效的体内免疫T细胞免疫激活能力，超强的免疫激活甚至出现一定的免疫过激反应，随后，另一个不同的抗体Utomilumab准入临床实验，但其临床效果不及Urelumab，这两个抗体仍在持续的临床验证中[1,2]。基于此，国际上正立足开发更好临床效果的CD137抗体，近来报道有新的CD137抗体进入临床前研究，考量进入临床可能，包括CD137单独和PD-1联合治疗，表现出对新型抗体的渴望及其研发的发展趋向[3]。

立足近年基础研究分析，早期产生的Urelumab和Utomilumab特异性结合位点存在明显的不同点，一个是天然配受体非封阻性，另一个则具有天然配受体封阻性，这可能导致不同的免疫治疗效果和毒性反应，平衡协同刺激效能和毒性反应，这是临床需要考量的重要问题。鉴于上述超强的协同刺激CD137抗体的系统应用(即，静脉用药)可能产生免疫过激活化现象，产生系统炎症副反应，而适度刺激强度的协同刺激CD137抗体，增加安全性，也适于导向肿瘤，进一步降低用量，有效的进行局部免疫调节[4]，有可能避免系统应用过程中的伴随毒性。就抗体本身而言，急切需要认知个性化CD137抗体“强”协同刺激T细胞和“弱”协同刺激T细胞产生的机理和分子基础，才可能适于不同需要的临床检测和治疗应用，基于这些新的认知，需要产出特征鲜明的新一代抗人CD137单克隆抗体。这一过程通常是从众多CD137抗体中“精细”筛选出差异性和特征鲜明的CD137抗体克隆，而活性特点根本上由抗体克隆独特序列、并与其形成独特空间结构的个性密切相关。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容