[发明专利]一种骨髓基质干细胞冻存液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种骨髓基质干细胞冻存液，其特征在于，每100ml所述骨髓基质干细胞冻存液包括：

乙二醇8～12ml、猴头菇多糖1～2g、黄芩苷0.2～0.8g、羟乙基淀粉2～5g、乙酰胺1～3g、维生素C 0.1～0.3g、谷胱甘肽1～3g、青霉素0.2～0.5g、DMSO 5～8g，余量为DMEM培养基。

2.根据权利要求1所述的骨髓基质干细胞冻存液，其特征在于，每100ml所述骨髓基质干细胞冻存液包括：

乙二醇10ml、猴头菇多糖1.5g、黄芩苷0.5g、羟乙基淀粉3g、乙酰胺2g、维生素C 0.2g、谷胱甘肽2g、青霉素0.3g、DMSO 6.5g，余量为DMEM培养基。

3.权利要求1或2所述的骨髓基质干细胞冻存液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(a)将乙二醇、羟乙基淀粉、乙酰胺、维生素C、谷胱甘肽和青霉素溶解于DMEM培养基中，过滤除菌，得到混合物；

(b)将猴头菇多糖和黄芩苷溶解于混合物，再次过滤除菌，即得所述骨髓基质干细胞冻存液。

4.权利要求1或2所述的骨髓基质干细胞冻存液在骨髓基质干细胞冻存中的应用。

5.一种骨髓基质干细胞的冻存方法，其特征在于，采用权利要求1或2所述的骨髓基质干细胞冻存液进行冻存。

6.根据权利要求5所述的冻存方法，其特征在于，所述冻存液中骨髓基质干细胞的浓度为(1～20)×10⁶个/ml。

7.根据权利要求5所述的冻存方法，其特征在于，所述冻存液中骨髓基质干细胞的浓度为1×10⁷个/ml。

8.根据权利要求5～7任一所述的冻存方法，其特征在于，所述冻存方法包括如下步骤：

将骨髓基质干细胞接种至所述冻存液中，先在0～4℃放置10～20min，再在﹣10～﹣20℃预冻1～2h，然后，以2～4℃/min降温至﹣80℃并保持2～5h，最后，转移至液氮中保存。

9.根据权利要求8所述的冻存方法，其特征在于，所述冻存方法包括如下步骤：

将骨髓基质干细胞接种至所述冻存液中，先在2℃放置15min，再在﹣15℃预冻2h，然后，以3℃/min降温至﹣80℃并保持4h，最后，转移至液氮中保存。