[发明专利]采用盐单胞菌株生产四氢嘧啶的方法

权利要求书

1.一种采用盐单胞菌株生产四氢嘧啶的方法，其特征在于：所采用的碳源由乙酸盐与丙酸盐构成混合碳源，通过盐单胞菌株Halomonas sp. YL01进行发酵制备，所述盐单胞菌株Halomonas sp. YL01保藏于广东省微生物菌种保藏中心，菌种保藏号为GDMCC.No62420，保藏日期为2022年04月24日；所述乙酸盐在发酵液中的浓度20-25 g/L，丙酸盐在发酵液中的浓度5-10 g/L；所述发酵温度为35-37℃，所述发酵所采用的培养基的pH值为9-11。

2.如权利要求1所述生产四氢嘧啶的方法，其特征在于：所述乙酸盐为乙酸钠、乙酸钾、乙酸铵中的一种或几种混合。

3.如权利要求1或2所述生产四氢嘧啶的方法，其特征在于：所述丙酸盐为丙酸钠、丙酸钾、丙酸铵中的一种或几种混合。

4.如权利要求1或2所述生产四氢嘧啶的方法，其特征在于：当采用摇瓶发酵时，接种盐单胞菌株Halomonas sp. YL01至摇瓶培养基，发酵培养。

5.如权利要求4所述生产四氢嘧啶的方法，其特征在于：摇瓶培养基由乙酸钠20-25 g/L、丙酸钠5-10 g/L、尿素0.5-10 g/L、天冬氨酸 0-10 g/L、酵母粉1-15 g/L、无水硫酸镁0.05-0.6 g/L、磷酸二氢钾1.5-5.5 g/L、氯化钠50-80 g/L、Fe(III)-NH₄-Citrate 0.05-0.1 g/L、CaCl₂·2H₂O 0.02-0.2 g/L、ZnSO₄·7H₂O 0.01-0.1 g/L、MnCl₂·4H₂O 0.002-0.02 g/L、H₃BO₃ 0.01-0.05 g/L、CoCl₂·6H₂O 0.005-0.02 g/L、CuSO₄·5H₂O 0.01-0.08g/L、NiCl₂·6H₂O 0.005-0.01 g/L和NaMoO₄·2H₂O 0.02-0.1 g/L组成。

6.如权利要求1或2所述生产四氢嘧啶的方法，其特征在于：当采用发酵罐发酵时，将菌种按接种量为5％-15％接入发酵罐培养基；发酵过程中控制溶氧为20％-40％；发酵培养，发酵期间检测乙酸含量，当乙酸含量低于10 g/L添加补料培养基，依据生长情况补料。

7.如权利要求6所述生产四氢嘧啶的方法，其特征在于：发酵罐培养基由乙酸钠20-25g/L、丙酸钠5-10 g/L、氯化钠50-80 g/L、酵母膏 1-10 g/L、MgSO₄ 1-10 g/L、尿素1-4 g/L、磷酸二氢钾3-10 g/L、第一微量元素组分 5-15 g/L和第二微量元素组分1-5 g/L组成。

8.如权利要求7所述生产四氢嘧啶的方法，其特征在于：第一微量元素组分具体包括Fe(III)-NH₄-Citrate 3-7 g/L、CaCl₂·2H₂O 1-3 g/L、HCl 3-7 M，通过去离子水配制；第二微量元素组分具体包括ZnSO₄·7H₂O 0.1-0.2 g/L、MnCl₂·4H₂O 0.02-0.04 g/L、H₃BO₃0.2-0.4 g/L、CoCl₂·6H₂O 0.1-0.3 g/L、CuSO₄·5H₂O 0.01-0.03 g/L、NiCl₂·6H₂O0.01-0.03 g/L、NaMoO₄·2H₂O 0.02-0.05 g/L，通过去离子水配制。