[发明专利]一种蛋白质组学标准品及其制备系统

说明书

本发明提供一种蛋白质组学标准品及其制备系统，涉及蛋白质组学技术领域。该蛋白质组学标准品及其制备系统，所述蛋白质组学标准品为从AC16细胞株中提取获得的细胞全蛋白质或由AC16细胞全蛋白质水解得到的多肽。通过采用AC16细胞作为该蛋白质组学标准品，AC16细胞为人体心肌细胞，人体的心肌细胞，含有丰富的肌原纤维，肌原纤维由粗肌丝和细肌丝组装而成，粗肌丝的成分是肌球蛋白，细肌丝的主要成分是肌动蛋白，辅以原肌球蛋白和肌钙蛋白，因此，心肌细胞中含有大量蛋白质，且人体心肌细胞可以完整记录人体的基因组，在确保成品产量的同时，确保成品的品质，提升该蛋白质组学标准品的使用效果。

技术领域

本发明涉及蛋白质组学技术领域，具体为一种蛋白质组学标准品及其制备系统。

背景技术

蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象，研究细胞、组织或生物体蛋白质组成及其变化规律的科学，其研究内容包括蛋白质的表达水平，翻译后的修饰，蛋白与蛋白相互作用等，由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生，细胞代谢等过程的整体而全面的认识，而在蛋白质组学研究实验过程中通常需要使用到蛋白质组学标准品来作为实验素材，进行研究。

现有的蛋白质组学标准品大多采用人体的肝肾组织癌变细胞作为基础进行培养，将培养后的细胞作为原材料进行蛋白质组学标准品制备，而癌变细胞本身的基因组相比于人体的正常细胞表达已发生改变，成品的质量难以得到保证，同时，现有的制备系统大多采用单一的溶液作为细胞缓冲液和细胞裂解液进行使用，导致整体的生产效率和产量不佳。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种蛋白质组学标准品及其制备系统，解决了现有的蛋白质组学标准品及其制备系统成品产量较低，品质不佳，系统对成品的评估和保存效果不好，整体的实用性不强的问题。

(二)技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种蛋白质组学标准品，所述蛋白质组学标准品为从AC16细胞株中提取获得的细胞全蛋白质或由AC16细胞全蛋白质水解得到的多肽。

一种蛋白质组学标准品制备系统，包括细胞存放模块，所述细胞存放模块连接有细胞培养模块，所述细胞培养模块连接有蛋白质分离模块，所述蛋白质分离模块连接有蛋白质水解模块；

所述蛋白质分离模块和蛋白质水解模块连接有成品评估模块，所述成品评估模块连接有成品保存模块。

优选的，所述细胞存放模块和成品保存模块连接有冷库模块，所述细胞培养模块连接有恒温箱模块和培养器模块。

优选的，所述蛋白质分离模块包括溶液配制模块和细胞处理模块，所述溶液配制模块连接有细胞缓冲液配制和细胞分解液配制，所述细胞处理模块连接有破碎处理模块和离心处理模块，所述破碎处理模块连接有细胞刮，所述离心处理模块连接有离心机。

优选的，所述蛋白质水解模块连接有试剂处理模块和成品富集模块，所述成品评估模块连接有质谱鉴定模块和稳定性评估模块。

一种蛋白质组学标准品，所述的蛋白质组学标准品由以下方法制备而成：

S1.AC16细胞预处理

取培养瓶装的AC16细胞，去除外包装，用75％酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，静置2-4小时，镜下观察，未超过80％汇合度时，加入5mL培养基混合均匀；

S2.AC16细胞培养

将混合均匀的细胞在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀，然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜，第二天换液并检查细胞密度，细胞密度达80％-90％，进行传代培养，连续采集9-11个代次细胞，每次分别采集9×10⁶细胞数备用；

S3.总蛋白质获取