[发明专利]一种双途径合成壳寡糖的全细胞及其生产方法

权利要求书

1.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌过表达了5种酶：N-乙酰氨基葡萄糖转运蛋白(NagP)、N-乙酰氨基葡萄糖激酶(NagK)、6-P-N-乙酰氨基葡萄糖变位酶(PGM)、几丁质合成酶(NodC)、脱乙酰基酶(NodB)。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述NagP的氨基酸序列是NCBI上CAP50125所示的序列；所述NagK的氨基酸序列是NCBI上CCI76387所示的序列；PGM的氨基酸序列是NCBI上BAB00614所示的序列；NodC的氨基酸序列是NCBI上BAF89814所示的序列；NodB的氨基酸序列是NCBI上XP_003323413所示的序列。

3.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为大肠杆菌基因工程菌、枯草芽孢杆菌基因工程菌或者酿酒酵母基因工程菌。

4.根据权利要求1-3任一所述的基因工程菌，其特征在于，所述NagP的基因序列如SEQID No.1所示；所述NagK的基因序列如SEQ ID No.2所示；所述PGM的基因序列如SEQ IDNo.3所示；所述NodC的基因序列如SEQ ID No.4所示；所述NodB的基因序列如SEQ ID No.5所示。

5.根据权利要求1-3任一所述的基因工程菌，其特征在于，所述NagP的基因序列如SEQID No.8所示；所述NagK的基因序列如SEQ ID No.9所示；所述PGM的基因序列如SEQ IDNo.10所示；所述NodC的基因序列如SEQ ID No.11所示；所述NodB的基因序列如SEQ IDNo.12所示。

6.权利要求1-3任一所述基因工程菌的构建方法。

7.一种壳寡糖合成的全细胞生产方法，其特征在于，所述方法是利用权利要求1-6任一所述的基因工程菌。

8.一种合成壳寡糖的多酶催化途径，其特征在于，所述途径以葡萄糖或者N-乙酰氨基葡萄糖为前体合成壳寡糖；当以葡萄糖为前体时，所述多酶催化途径主要包含己糖激酶(pfkA)、6-磷酸葡萄糖异构酶(pgi)、6-磷酸葡萄糖氨基转移酶(glmS)、6-磷酸葡萄糖胺变位酶(glmM)、1-磷酸葡萄糖胺酰基转移酶(glmU)、UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶(glmU)、几丁质合成酶(NodC)、脱乙酰基酶(NodB)七种酶蛋白；当以N-乙酰氨基葡萄糖为前体时，所述多酶催化途径主要包含N-乙酰氨基葡萄糖转运蛋白(NagP)、N-乙酰氨基葡萄糖激酶(NagK)、磷酸化N-乙酰氨基葡萄糖变位酶(PGM)、UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶(glmU)、几丁质合成酶(NodC)、脱乙酰基酶(NodB)六种酶蛋白。

9.权利要求1-6任一所述的基因工程菌或者权利要求8所述的多酶催化途径的应用，所述应用是用于生物化工、制药或食品领域。

10.根据权利要求9所述的应用，所述应用是用于实现壳寡糖的合成。