[发明专利]具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株在审
申请号: | 202211685809.3 | 申请日: | 2022-12-27 |
公开(公告)号: | CN116200366A | 公开(公告)日: | 2023-06-02 |
发明(设计)人: | 陈庭坚;汪杨铭;王光远;马杰钊;刘又萌 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12P19/34 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 林奕聪 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 xna 合成 转录 活性 bst dna 聚合 突变 | ||
1.具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,包括Bst DNA聚合酶突变株Sso7d-Bst、Bst DNA聚合酶突变株Bst(I659E,E660G)和Bst DNA聚合酶突变株Sso7d-Bst(I659E,E660G);所述Bst DNA聚合酶突变株既能识别及合成天然DNA,又能识别、合成及反转录RNA以及2’-F、2’-OMe修饰核酸的Bst DNA聚合酶突变株。
2.根据权利要求1所述具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,所述Bst DNA聚合酶突变株Sso7d-Bst,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求1所述具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,所述Bst DNA聚合酶突变株Bst(I659E,E660G),其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.根据权利要求1所述具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,所述Bst DNA聚合酶突变株Sso7d-Bst(I659E,E660G),其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
5.根据权利要求1所述具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,编码所述Bst DNA聚合酶突变株Sso7d-Bst的基因,其基因序列如SEQ ID NO.4所示。
6.根据权利要求1所述具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,编码所述Bst DNA聚合酶突变株Bst(I659E,E660G)的基因,其基因序列如SEQ ID NO.5所示。
7.根据权利要求1所述具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,编码所述Bst DNA聚合酶突变株Sso7d-Bst(I659E,E660G)的基因,其基因序列如SEQ IDNO.6所示。
8.根据权利要求1所述具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,所述Sso7d-Bst突变株是通过重叠延伸PCR技术在野生型Bst DNA基因中引入Sso7d序列获得的。
9.根据权利要求1所述具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,所述Bst(I659E,E660G)突变株是将SFM-4-3聚合酶的突变位点I614E、E615G通过由重叠延伸PCR介导的定点突变的方法移植到Bst DNA聚合酶中获得的。
10.根据权利要求1所述具有XNA合成及反转录活性的Bst DNA聚合酶突变株,其特征在于,所述Sso7d-Bst(I659E,E660G)突变株是将SFM-4-3聚合酶的突变位点I614E、E615G通过由重叠延伸PCR介导的定点突变的方法移植到Sso7d-Bst突变株中获得的。
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