[发明专利]Aβ42-hIAPP共寡聚化物诱导的AD脑类器官病理模型方法

权利要求书

1.Aβ42-hIAPP共寡聚化物诱导的AD脑类器官病理模型方法，其特征在于：将Aβ42-hIAPP共寡聚化物注射到脑类器官实质内，并在体外继续培养至获得AD脑类器官病理模型。

2.根据权利要求1所述的Aβ42-hIAPP共寡聚化物诱导的AD脑类器官病理模型方法，其特征在于：所述脑类器官实质为由人源诱导性多能干细胞诱导的全脑类器官。

3.根据权利要求1所述的Aβ42-hIAPP共寡聚化物诱导的AD脑类器官病理模型方法，其特征在于：所述脑类器官实质先在体外培养90天以上，然后通过微泵注射所述Aβ42-hIAPP共寡聚化物；注射速度为10nL/s以下，每次注射量为3μg以下，在3-4个月内共注射12μg以下。

4.根据权利要求3所述的Aβ42-hIAPP共寡聚化物诱导的AD脑类器官病理模型方法，其特征在于：所述脑类器官实质先在体外培养100天以上，然后通过微泵注射所述Aβ42-hIAPP共寡聚化物；注射速度为4～6nL/s，每次注射量为1～2μg，在3-4个月内共注射4～6μg。

5.根据权利要求4所述的Aβ42-hIAPP共寡聚化物诱导的AD脑类器官病理模型方法，其特征在于：所述注射速度为5nL/s，每次注射量为1μg，在3-4个月内共注射4μg。

6.根据权利要求1所述的Aβ42-hIAPP共寡聚化物诱导的AD脑类器官病理模型方法，其特征在于：所述Aβ42-hIAPP共寡聚化物由可溶性β-淀粉样蛋白42寡聚体与人胰岛淀粉样蛋白多肽合成。

7.根据权利要求1所述的Aβ42-hIAPP共寡聚化物诱导的AD脑类器官病理模型方法，其特征在于：所述Aβ42-hIAPP共寡聚化物的合成方法如下：

(1)Aβ42以及hIAPP冻干肽分别溶于100％1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇中，浓度1mM，室温孵育1h后，将含hIAPP肽溶液于温和的氮气流下蒸发1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇得到干燥hIAPP肽膜；

(2)Aβ42与hIAPP肽膜分别在二甲亚砜中重悬，然后在浓度10mM HEPES缓冲液中进一步稀释，最终浓度为皆为110μM；

(3)快速取两体系1：1混匀，4℃共同孵育24h即得Aβ42-hIAPP共寡聚化物。