[发明专利]一种白介素检测试剂盒及其捕获微球抗体配比优化方法

权利要求书

1.一种白介素检测试剂盒，其特征在于，包括捕获微球抗体、检测抗体、SA-PE、实验缓冲液以及洗涤缓冲液，其中捕获微球抗体包括IL-2RA捕获微球抗体、IL-18捕获微球抗体、IL-33捕获微球抗体、IL-23捕获微球抗体、IL-27捕获微球抗体、IL-22捕获微球抗体；所述检测抗体为生物素标记的白介素配对抗体；所述SA-PE为藻红蛋白标记的链霉亲和素；所述洗涤缓冲液为含tween-20的磷酸盐缓冲液。

2.根据权利要求1所述的一种白介素检测试剂盒，其特征在于，所述捕获微球抗体中，IL-2RA捕获微球抗体、IL-18捕获微球抗体、IL-33捕获微球抗体、IL-23捕获微球抗体、IL-27捕获微球抗体、IL-22捕获微球抗体的浓度均为0.1～5μg/mL。

3.根据权利要求1所述的一种白介素检测试剂盒，其特征在于，所述实验缓冲液选自三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、3-吗啉丙磺酸缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液、2-(N-吗啉代)乙磺酸缓冲液、3-(环己氨基)2-羟基-1-丙磺酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、巴比妥钠缓冲液、硼酸缓冲液、磷酸盐缓冲液中的一种或几种。

进一步的，所述实验缓冲液中还包括牛血清白蛋白。

4.根据权利要求1所述的一种白介素检测试剂盒，其特征在于，所述实验缓冲液为含牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液。

5.根据权利要求2所述的一种白介素检测试剂盒，其特征在于，优选的，所述捕获微球抗体中，IL-2RA捕获微球抗体、IL-18捕获微球抗体、IL-33捕获微球抗体、IL-23捕获微球抗体、IL-27捕获微球抗体、IL-22捕获微球抗体的浓度均为1～5μg/mL。

6.一种白介素检测试剂盒的捕获微球抗体配比优化方法，其特征在于，用于对权利要求1-5任一项所述的一种白介素检测试剂盒的捕获微球抗体中，IL-2RA捕获微球抗体、IL-18捕获微球抗体、IL-33捕获微球抗体、IL-23捕获微球抗体、IL-27捕获微球抗体、IL-22捕获微球抗体的浓度的配比进行优化，所述方法包含以下步骤：

S10：针对捕获微球抗体每一种单抗，制备序列浓度的单抗；

S20：分别将制备好的单抗与待测人体检测样品采用微球流式免疫荧光发光法检测，得到IL-2RA捕获微球抗体、IL-18捕获微球抗体、IL-33捕获微球抗体、IL-23捕获微球抗体、IL-27捕获微球抗体、IL-22捕获微球抗体中每一种抗体的浓度，记为第一浓度集合；

S30：将所述制备的序列浓度的单抗两两组合，形成混合液，分别将每一组混合液与待测人体检测样品采用微球流式免疫荧光发光法检测，得到IL-2RA捕获微球抗体、IL-18捕获微球抗体、IL-33捕获微球抗体、IL-23捕获微球抗体、IL-27捕获微球抗体、IL-22捕获微球抗体中每一种抗体的浓度，记为第二浓度集合；

S40：针对每一种抗体，筛选第二浓度集合中与第一浓度集合相差度最小的浓度作为第三浓度集合；

S50：将第三浓度集合中对应的混合液配比作为基础配比；

S60：使用近邻传播聚类算法将得到的基础配比聚为一类，并计算得到改类的聚类中心，作为捕获微球抗体中每一类单抗的浓度配比；

S70：按照得到的每一类单抗的浓度配比制备捕获微球抗体。

7.根据权利要求6所述的一种白介素检测试剂盒的捕获微球抗体配比优化方法，其特征在于，所述序列浓度的浓度数值间隔不大于1μg/mL。

8.根据权利要求7所述的一种白介素检测试剂盒的捕获微球抗体配比优化方法，其特征在于，所述浓度数值间隔为0.25μg/mL。