[发明专利]一种白介素检测试剂盒及其捕获微球抗体配比优化方法在审

专利信息
申请号: 202211694718.6 申请日: 2022-12-28
公开(公告)号: CN115856280A 公开(公告)日: 2023-03-28
发明(设计)人: 王硕硕;徐艳艳;赵建华;彭永毅;宁平;孙谧 申请(专利权)人: 青岛瑞斯凯尔生物科技有限公司
主分类号: G01N33/53 分类号: G01N33/53;G01N33/533;G01N33/543
代理公司: 武汉聚信汇智知识产权代理有限公司 42258 代理人: 郝雅娟
地址: 266000 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 白介素 检测 试剂盒 及其 捕获 抗体 配比 优化 方法
【说明书】:

发明提供了一种白介素检测试剂盒及其配比优化方法,属于生物检测技术领域,该白介素检测试剂盒包括捕获微球抗体、检测抗体、SA‑PE、实验缓冲液以及洗涤缓冲液,其中捕获微球抗体包括IL‑2RA捕获微球抗体、IL‑18捕获微球抗体、IL‑33捕获微球抗体、IL‑23捕获微球抗体、IL‑27捕获微球抗体、IL‑22捕获微球抗体;所述检测抗体为生物素标记的白介素配对抗体,能够减少现有的抗白介素的抗体检测方法存在假阴性的问题。该白介素检测试剂盒的捕获微球抗体配比优化方法通过少量实验,结合近邻传播聚类算法和深度学习网络对配比进行优化,使得优化后的单抗互相之间干扰程度降低,提高白介素检测试剂盒的检测精度。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域,具体而言,涉及一种白介素检测试剂盒及其捕获微球抗体配比优化方法。

背景技术

白介素是一类细胞因子,在免疫系统中发挥重要的调节作用,因其种类众多,因此也是一类调控作用最为广泛的细胞因子。目前已发现40多种白介素,不同的家族成员因其细胞来源及相关信号调节方式的不同发挥抗炎或促炎作用。其异常表达可导致免疫性疾病如银屑病、类风湿关节炎、哮喘及癌症等疾病的发生发展。

现有的白介素的抗体检测方法存在假阳性和假阴性的问题。经发明人研究发现,假阴性的问题根源在于:双抗体夹心方法在捕获样本中的白介素后,存在与后续的检测抗体结合效率降低的问题,导致本来是阳性样本而无法检测出,导致假阴性;假阳性的问题根源在于:受样本中大量的无关抗体干扰,导致假阳性等检测失真。

另外,由于不同的白介素检测试剂如白介素-2RA/白介素-18/白介素-33/白介素-23/白介素-27/白介素-22检测试剂同时进行使用,采用双抗体夹心方法在捕获样本中的白介素后存在多种不同白介素检测试剂互相干扰以致检测精度降低的问题。

发明内容

有鉴于此,本发明提供一种白介素检测试剂盒,能够有效减少现有的白介素的抗体检测方法存在假阴性的问题;并提供一种白介素检测试剂盒的捕获微球抗体配比优化方法,能够有效解决采用双抗体夹心方法在捕获样本中的白介素后存在多种不同白介素检测试剂互相干扰以致检测精度降低的问题。

本发明是这样实现的:

本发明的第一方面提供一种白介素检测试剂盒,其中,包括捕获微球抗体、检测抗体、SA-PE、实验缓冲液以及洗涤缓冲液,其中捕获微球抗体包括IL-2RA捕获微球抗体、IL-18捕获微球抗体、IL-33捕获微球抗体、IL-23捕获微球抗体、IL-27捕获微球抗体、IL-22捕获微球抗体;所述检测抗体为生物素标记的白介素配对抗体;所述SA-PE为藻红蛋白标记的链霉亲和素;所述洗涤缓冲液为含tween-20的磷酸盐缓冲液。

进一步的,还包括:稳定剂1和稳定剂2,所述稳定剂1和稳定剂2选自乙二胺四乙酸二钠、牛血清白蛋白、山梨醇、葡萄糖、海藻糖中的一种或几种;所述无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化镁、硫酸镁中的一种或几种。

进一步的,还包括:表面活性剂,所述表面活性剂选自Tween系列、Triton系列、月桂醇聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚、槐糖脂中的一种或几种。

进一步的,还包括:促凝剂,所述促凝剂选自聚乙二醇6000、聚乙二醇8000、聚乙二醇20000中的一种或几种。

进一步的,还包括:防腐剂,所述防腐剂选自叠氮钠、proclin300、硫柳汞钠、苯酚、尼泊金乙酯中的一种或几种。

进一步的,还包括:抗氧化剂,所述抗氧化剂选自L-抗坏血酸、硫代二丙酸二月桂酯、2,6二叔丁基对甲酚、丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、特丁基对苯二酚中的一种或几种。

在上述技术方案的基础上,本发明的一种白介素检测试剂盒还可以做如下改进:

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