[发明专利]一种黄素单加氧酶制备酚类化合物的方法

权利要求书

1.一种黄素单加氧酶制备酚类化合物的方法，其特征在于，所述方法是4-羟基苯乙酸-3-单加氧酶和NAD(P)H-黄素氧化还原酶共表达催化制备酚类化合物。

2.如权利要求1所述的一种黄素单加氧酶制备酚类化合物的方法，所述方法是4-羟基苯乙酸-3-单加氧酶和NAD(P)H-黄素氧化还原酶共表达获得的。

3.如权利要求2所述的一种黄素单加氧酶制备酚类化合物的方法，其特征在于，所述共表达是将4-羟基苯乙酸-3-单加氧酶编码基因和NAD(P)H-黄素氧化还原酶编码基因经linker连接后克隆至表达载体，在经宿主进行表达。

4.如权利要求3所述的一种黄素单加氧酶制备酚类化合物的方法，其特征在于，所述4-羟基苯乙酸-3-单加氧酶，GenBank编号为：CAD6019151.1，但不限于此来源的4-羟基苯乙酸-3-单加氧酶基因。

5.如权利要求3所述的一种黄素单加氧酶制备酚类化合物的方法，其特征在于，所述NAD(P)H-黄素氧化还原酶，GenBank编号为：CAD6019161.1，但不限于此来源的NAD(P)H-黄素氧化还原酶基因。

6.如权利要求3所述的一种黄素单加氧酶制备酚类化合物的方法，其特征在于，所述表达载体为pET-28a质粒，包括但不限于pET-28a质粒、pET-22b质粒；所述宿主包括但不限于：大肠杆菌BL21、枯草芽孢杆菌。

7.如权利要求3所述的一种黄素单加氧酶制备酚类化合物的方法，其特征在于，所述linker包括但不限于：GSGGTG、SSRGRTSG、GGSGGSGGSGGSGGS、GGGGSGGGGS。

8.如权利要求3所述的一种黄素单加氧酶制备酚类化合物的方法，其特征在于，将4-羟基苯乙酸-3-单加氧酶的编码基因hpaB与NAD(P)H-黄素氧化还原酶的编码基因hpaC经linker(GGGGSGGGGS)连接后，克隆至pET-28a表达载体，再在大肠杆菌BL21中表达实现。

9.由权利要求1-8任意一项所述方法制备的4-羟基苯乙酸-3-单加氧酶和NAD(P)H-黄素氧化还原酶共表达产物-连接蛋白HpaB-HpaC。

10.由权利要求9所述HpaB、HpaC和连接蛋白HpaB-HpaC在制备酚类化合物中的应用。