[发明专利]酰基辅酶A氧化酶的制备方法和应用在审
| 申请号： | 202211704989.5 | 申请日： | 2022-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN116042664A | 公开（公告）日： | 2023-05-02 |
| 发明（设计）人： | 王佳;张伟;蒋析文;吴宇鹏;刘文丽;罗小丽 | 申请（专利权）人： | 广州达安基因股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12N9/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海上谷知识产权代理有限公司 31342 | 代理人： | 蔡继清 |
| 地址： | 510665 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基辅 氧化酶 制备 方法 应用 | ||
1.一种编码酰基辅酶A氧化酶的分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸经密码子优化，且所述多核苷酸选自以下任一种：
(i)如SEQ ID NO.1所示的多核苷酸；
(ii)与如SEQ ID NO.1所示序列的同源性大于95％的多核苷酸；和
(iii)与(i)或(ii)中所述的序列互补的多核苷酸。
2.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包括如权利要求1所述的多核苷酸。
3.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体为大肠杆菌表达载体，优选为pET-28a(+)。
4.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包括如权利要求2或3所述的表达载体；或者
所述宿主细胞的基因组中整合有如权利要求1所述的多核苷酸。
5.一种制备酰基辅酶A氧化酶的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
使含有如权利要求1所述的多核苷酸载体转化宿主细胞；
培养所述宿主细胞，以表达所述酰基辅酶A氧化酶。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，使用TB培养基培养所述的宿主细胞。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在温度为16至19℃下培养所述宿主细胞。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，培养所述宿主细胞时，所用培养基中含有卡那霉素抗性基因。
9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，培养所述宿主细胞时，通过IPTG诱导以表达出目的蛋白。
10.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：如权利要求1所述的多核苷酸；或者
如权利要求2或3所述的表达载体；或者
如权利要求4所述的宿主细胞；或者
根据权利要求5至9任一项所述的方法所制备的酰基辅酶A氧化酶。
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