[发明专利]一种咔喏霉素中有关物质的检测方法

权利要求书

1.一种咔喏霉素中有关物质的检测方法，其特征在于，使用高效液相色谱法对咔喏霉素中有关物质进行检测，其色谱条件为：

采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂5μm*4.6*250mm的色谱柱；以pH 4.5-4.7的磷酸二氢铵溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱；所述咔喏霉素主峰的保留时间在38～41分钟之间。

2.根据权利要求1所述的一种咔喏霉素中有关物质的检测方法，其特征在于，按下表进行梯度洗脱：

3.根据权利要求1所述的一种咔喏霉素中有关物质的检测方法，其特征在于，所述色谱条件还包括：进样量为15-25μl；流速为0.8-1.2ml/min；检测时间为95min；柱温为25-30℃；检测波长为220-225nm。

4.根据权利要求1-3任一所述的一种咔喏霉素中有关物质的检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤如下：

(1)色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂5μm*4.6*250mm的色谱柱；以pH4.5-4.7的磷酸二氢铵溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱；进样量为15-25μl；流速为0.8-1.2ml/min；检测时间为95min，后运行15min；柱温为25-30℃；检测波长为220-225nm；所述咔喏霉素主峰的保留时间在38～41分钟之间，按下表进行梯度洗脱：

(2)流动相溶液制备：以pH 4.5-4.7的磷酸二氢铵溶液为流动相A，以乙腈为流动相B；

(3)空白溶液制备：以步骤(1)中初始流动相溶液为空白溶液，即流动相A和流动相B以体积比为64-66:34-36的混合溶液；

(4)供试品溶液制备：取咔喏霉素适量，加步骤(3)中空白溶液作为溶剂溶解并稀释制成每1ml含0.9-1.1mg咔喏霉素的溶液，作为供试品溶液；

(5)精密量取空白溶液、供试品溶液适量，注入液相色谱仪，记录色谱图。

5.根据权利要求1-3任一所述的一种咔喏霉素中有关物质的检测方法，其特征在于，所述色谱柱为Welch ULtimateXB-C18色谱柱(5μm，4.6*250mm)或其他等效色谱柱。

6.根据权利要求1-3任一所述的一种咔喏霉素中有关物质的检测方法，其特征在于，以pH4.6的磷酸二氢铵溶液为流动相A。

7.根据权利要求3或4所述的一种咔喏霉素中有关物质的检测方法，其特征在于，所述色谱条件中流速为09-1.1ml/min。

8.根据权利要求3或4所述的一种咔喏霉素中有关物质的检测方法，其特征在于，所述色谱条件中，进样量为20μl；流速为1.0ml/min；柱温为30℃，检测波长为220nm。