[发明专利]一种用于石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理液及其应用在审
申请号: | 202211719471.9 | 申请日: | 2022-12-30 |
公开(公告)号: | CN115976169A | 公开(公告)日: | 2023-04-18 |
发明(设计)人: | 黄颖;蔡晓懿;陈绍宇 | 申请(专利权)人: | 广州普希盛科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6841 | 分类号: | C12Q1/6841;G01N1/36;G01N1/28;G01N1/44 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 刘二艳 |
地址: | 510000 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 石蜡 包埋 组织 样本 fish 检测 处理 及其 应用 | ||
1.一种用于石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理液,其特征在于,所述前处理液含有保护液和透明剂;
所述保护液含有乙二胺四乙酸、碱性金属氯化物和缓冲液;
所述透明剂含有叔丁醇、聚乙二醇或表面活性剂中任意一种或至少两种的组合。
2.根据权利要求1所述的用于石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理液,其特征在于,所述碱性金属氯化物包括氯化钠、氯化钾或氯化锂中任意一种或至少两种的组合;
优选地,所述缓冲液包括Tris-HCl缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液或巴比妥钠-盐酸缓冲液中任意一种;
优选地,所述聚乙二醇的平均相对分子质量为200~1500;
优选地,所述表面活性剂包括聚乙二醇对异辛基苯基醚、十二烷基硫酸盐、吐温或NP40中任意一种或至少两种的组合;
优选地,所述聚乙二醇对异辛基苯基醚包括聚乙二醇对异辛基苯基醚-100、聚乙二醇对异辛基苯基醚-114;
优选地,所述十二烷基硫酸盐包括十二烷基硫酸钠和/或十二烷基硫酸锂;
优选地,所述吐温包括吐温20和/或吐温80。
3.根据权利要求1或2所述的用于石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理液,其特征在于,所述前处理液中所述乙二胺四乙酸的浓度为10~100mmol/L;
优选地,所述前处理液中所述碱性金属氯化物的浓度为50~300mmol/L;
优选地,所述前处理液中缓冲盐的浓度为5~50mmol/L;
优选地,所述前处理液中所述透明剂的质量百分比为0.5~10%。
4.权利要求1-3任一项所述的用于石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理液在制备检测石蜡包埋组织样本的产品中的应用。
5.一种石蜡包埋组织样本前处理试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1-3任一项所述的用于石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理液。
6.一种石蜡包埋组织样本FISH检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1-3任一项所述的用于石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理液;
优选地,所述试剂盒还包括FISH检测试剂。
7.权利要求1-3任一项所述的用于石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理液在石蜡包埋组织样本的FISH检测中的应用。
8.一种石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理方法,其特征在于,所述方法包括:
将待检测石蜡包埋组织样本依次进行切片处理、烤片处理和脱蜡处理,将脱蜡处理后样本与权利要求1-3任一项所述的用于石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理液混合,进行加热处理,将加热处理后样本进行酶消化处理。
9.根据权利要求8所述的石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理方法,其特征在于,所述加热处理的温度为60~95℃,时间为10~2000min;
优选地,所述酶消化处理的工具酶包括蛋白酶K、胃蛋白酶或胰蛋白酶中任意一种或至少两种的组合;
优选地,所述酶消化处理温度为20~50℃,时间为1~50min。
10.一种石蜡包埋组织样本FISH检测方法,其特征在于,所述方法包括:
利用权利要求8或9所述的石蜡包埋组织样本FISH检测的前处理方法对石蜡包埋组织样本进行前处理,对前处理后样本进行FISH检测。
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