[发明专利]一种检测氟尿嘧啶注射液中氟乙醛的方法

说明书

本发明公开了一种检测氟尿嘧啶注射液中氟乙醛的方法，使用二硝基苯肼溶液衍生处理样品，采用高效液相色谱仪测定，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，采用紫外检测器，检测波长350‑360nm；流动相A为pH值为2.5的磷酸盐缓冲液，流动相B为乙腈；进样量为18μL‑22μL，流速0.9‑1.1mL/min；梯度洗脱。本发明的方法操作简便，专属性良好；灵敏度高，检测限浓度可达1.21ng/ml，定量限12.1ng/ml向供试品中添加已知浓度的氟乙醛溶液，加标回收率81.4％，方法准确度良好；该方法适用于氟尿嘧啶注射液中痕量氟乙醛杂质的定量检测。

技术领域

本发明属于氟尿嘧啶注射液技术领域，尤其涉及一种检测氟尿嘧啶注射液中氟乙醛的方法。

背景技术

药品在临床使用过程中产生的不良反应除了与主成分的药理活性有关，与杂质的影响也密不可分，为保证临床用药安全，必须严格控制药品中的杂质。氟尿嘧啶注射液作为一种抗癌药，主要用于治疗消化道肿瘤，或较大剂量氟尿嘧啶治疗绒毛膜上皮癌。亦常用于治疗乳腺癌、卵巢癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌及皮肤癌等。氟尿嘧啶注射液的主要水解降解途径包括两条不同的降解路线，其中路线一降解最终生成5-羟基尿嘧啶；降解路线2的最终降解产物为尿素和氟乙醛。

氟乙醛是一种基因毒性杂质，必须加以研究并严格控制以确保其临床用药的安全性。参考ICH协调指南M7《评估和控制药物中DNA反应性(致突变)杂质以限度潜在的致癌风险的行业指南》中依据氟尿嘧啶注射液临床最大日剂量经计算，氟尿嘧啶注射液中氟乙醛的限度需要严格控制在约8ppm以内。

目前，2020年版英国药典给出了一种采用高效液相色谱仪(HPLC)检测杂质B的有关物质方法和一种薄层色谱法检测尿素。上述两种方法均无法满足氟尿嘧啶注射液中痕量氟乙醛的检测需求，目前尚无氟尿嘧啶注射液中痕量氟乙醛定量检测方法报道，因此，急需一种高灵敏度的氟乙醛检测方法满足氟尿嘧啶注射液中痕量氟乙醛的检测需求，确保氟尿嘧啶注射液的临床用药安全。

发明内容

本发明的目的为：提供一种检测氟尿嘧啶注射液中氟乙醛的方法。可以实现氟尿嘧啶注射液中痕量氟乙醛的检测，且灵敏度高。

本发明的发明构思：

本发明利用氟乙醛与二硝基苯肼衍生生成腙，产物带有强紫外吸收基团(芳基和-NO₂)，通过高效液相色谱测试其中腙的含量从而测定氟乙醛的含量。

本发明的技术方案为：一种检测氟尿嘧啶注射液中氟乙醛的方法，包括以下步骤：

步骤一，衍生液的制备

配制pH值为4.5-5.5的乙酸-乙酸钠缓冲液；将所述乙酸-乙酸钠缓冲液与二硝基苯肼溶液混合即得衍生液；

步骤二，供试样品溶液制备与测试

精密量取待测氟尿嘧啶注射液和所述衍生液置于同一量瓶中,加乙酸调pH值为3.0-3.5，封口，进行衍生反应；

所述衍生反应的条件如下：30-60℃反应20min－60min，冷却至室温，用所述乙酸-乙酸钠缓冲液定容；

采用反相高效液相色谱法检测所述供试样品溶液中的氟乙醛，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，采用紫外检测器，检测波长350-360nm；流动相A为pH值为2.5的磷酸盐缓冲液，所述流动相B为乙腈；进样量为18μL-22μL，流速0.9-1.1mL/min；梯度洗脱。