[发明专利]一种快速鉴定中间偃麦草1Js

说明书

本发明公开了一种快速鉴定中间偃麦草1Jsupgt;s/supgt;染色体的方法。属于植物分子遗传技术领域。包括提取植株基因组DNA，进行PCR扩增；若扩增得到任一目标片段，则具有中间偃麦草1Jsupgt;s/supgt;染色体基因。本发明发现的分子标记可用于中间偃麦草或小麦与中间偃麦草远缘杂交过程中中间偃麦草染色体工程系(染色体附加系、代换系、易位系和双二倍体)中1Jsupgt;s/supgt;染色体或1Jsupgt;s/supgt;染色体片段的快速检测。本发明对于中间偃麦草遗传育种领域中1Jsupgt;s/supgt;染色体的鉴别具有重要价值。

技术领域

本发明涉及植物分子遗传技术领域，更具体的说是涉及一种快速鉴定中间偃麦草1J^s染色体的方法。

背景技术

中间偃麦草(Thinopyrum intermedium,2n＝6x＝42,JJ^sS)是禾本科偃麦草属多年生草本植物，又被称为天蓝偃麦草、天蓝冰草或中间薄冰草，是一种长日照、强冬性、多年生野生牧草。中间偃麦草原产于东欧，天然分布于高加索、中亚等地带，在我国主要分布于青海、新疆、内蒙古、东北等地区。3年以上中间偃麦草株高一般为80～140厘米，穗长20～30厘米，其叶量丰富，草质优良，纤维素及蛋白质含量高，适口性好，牛、马、羊均喜食，可作为优良的牧草资源。它根系发达，耐寒性极强，适宜在高寒、干旱及半干旱地区用于水土保持、防风固沙和堤坝保护，在长江、黄河等大江大河上游生态环境保护中可起到较大的作用。同时，它还免疫小麦、大麦等谷物作物的白粉、条锈、叶锈、杆锈等多种病害，高抗根腐病、叶枯病、纹枯病、赤霉病、黄矮病、条纹花叶病等，是谷物作物遗传改良的重要基因资源。

将中间偃麦草的优异基因，通过远缘杂交导入栽培作物中，是现代作物遗传改良的重要研究内容。早在1930年，苏联的H.B.齐津就开始了小麦与中间偃麦草的远缘杂交工作，并于1948年选育出了小冰1号、小冰186和小冰559等小冰麦新品种。孙善澄等(1953)采用有性杂交、连续回交和后代定向选择的方法，利用小麦和中间偃麦草选育出了中1、中2、中3、中4、中5等农艺性状优良的八倍体小偃麦新物种——小麦-中间偃麦草部分双二倍体。Gauderon等(1966)利用回交法育成的小麦-中间偃麦草部分双二倍体TAF46，对小麦黄矮病、条纹花叶病具有优良抗性。Liu等(2005)在烟农15和中间偃麦草杂交后代中，利用St基因组作探针的GISH方法筛选出了抗白粉病的部分双二倍体E990256。Bao等(2009)综合利用形态学、细胞学、基因组原位杂交等技术，从普通小麦与中间偃麦草杂种后代中选育出了TE253和TE257等10个TE系列八倍体小偃麦。

近年来，亓晓蕾(2017)、崔玉(2018)、张文杰(2020)、Li Jianbo(2021)、Hu Junmei(2022)、Zhang Xiaojun(2022)等利用小麦与中间偃麦草远缘杂交，选育出大量双二部体、附加系、代换系等育种新种质。但由于中间偃麦草的全基因组图谱尚未公布，中间偃麦草染色体的鉴定普遍以细胞学手段包括C-带、N-带、GISH、FISH为主，存在检测分辨率低、鉴定速度慢等问题，严重影响了中间偃麦草基因资源的有效利用。分子标记技术的发展为其分子鉴定提供了新的发展方向，利用基于中间偃麦草序列开发的特异分子标记可有效解决这一问题。

综上，如何提供一种快速鉴定中间偃麦草1J^s染色体的方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种快速鉴定中间偃麦草1J^s染色体的方法。本发明提供4个中间偃麦草1J^s染色体特异分子标记，用于快速检测中间偃麦草的1J^s染色体。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种快速鉴定中间偃麦草1J^s染色体的方法，包括：

提取植株基因组DNA，进行PCR扩增；