[发明专利]利用分子信标检测CHO核酸残留的方法及引物和试剂盒有效
申请号: | 202310013694.1 | 申请日: | 2023-01-05 |
公开(公告)号: | CN115976232B | 公开(公告)日: | 2023-08-15 |
发明(设计)人: | 潘彦鹏;柳丽萍;郭求真 | 申请(专利权)人: | 鲲鹏基因(北京)科技有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 北京博观达知识产权代理事务所(普通合伙) 11977 | 代理人: | 朱晓娟 |
地址: | 102206 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 分子 信标 检测 cho 核酸 残留 方法 引物 试剂盒 | ||
1.一种检测CHO核酸残留的试剂盒,其特征在于,包括第一引物、第二引物、第一探针和第二探针,所述第一引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,所述第二引物序列如SEQID NO.3和SEQ ID NO.4所示,所述第一探针的序列如SEQ ID NO.5所示,所述第二探针的序列如SEQ ID NO.6所示。
2.利用分子信标检测CHO核酸残留的非疾病诊断和治疗目的方法,其特征在于,包括如下步骤:
第一步,稀释标准品作为标准品样本DNA;
第二步,利用权利要求1所述的试剂盒对所述第一步中的标准品样本DNA进行PCR检测,得到用于CHO核酸检测的标准曲线;
第三步,利用如权利要求1所述的试剂盒对待检测的DNA样本或阳性样本,进行荧光定量PCR扩增;
第四步,对PCR扩增产物的荧光强度进行实时检测,并与所述第二步获得的所述标准曲线对照,从而测得待检测的DNA样本中CHO核酸的残留量。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述第一步中,所述标准品的稀释为10倍梯度稀释,分别为300pg、30pg、3pg、300fg、30fg和3fg。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,引物组的浓度为200nM、探针组的浓度为200nM、Taq酶的浓度为1U、Mg2+的浓度为3mM和dNTP的浓度为200μM。
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