[发明专利]益生菌GR-5及其在生产低嘌呤啤酒中的应用

权利要求书

1.一种益生菌菌株，所述益生菌菌株是乳酸片球菌Pediococcus acidilactici GR-5，该菌株于2022年9月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号为：CGMCCNo.25729。

2.一种能高效降解嘌呤类物质益生菌的分离方法，包括如下步骤：

(1)对甘肃浆水中微生物的分离，选择琴姨牌新鲜浆水梯度稀释后均匀涂布于MRS固体培养基，得到的单菌落挑出接种至MRS液体培养基扩培；

(2)菌株革兰氏染色鉴定，上述备选单菌使用结晶紫初染后水洗，加碘液媒染后水洗并使用95％乙醇脱色，加番红液复染水洗干燥后使用油镜观察形态，筛去阴性菌株及酵母菌；

(3)菌株体外纯嘌呤化合物降解能力测定，采用HPLC测定处理单位时间后次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟嘌呤、腺嘌呤含量评估降解效果；

(4)菌株的鉴定，采用16S rRNA基因测序来鉴定分离株的系统发育特征；使用扫描电子显微镜测定菌株GR-5的形态特征；

3.低嘌呤益生菌啤酒最适备选菌株的筛选方法，包括如下步骤：

(1)称取所述低嘌呤益生菌啤酒的原材料中的干储大麦与食品级糖化酶，将干储大麦粉碎过筛；将各原材料干物料组分加水进行混合得到第一混合液；70℃饮用水的添加量为干物质重量的2.5倍；

(2)将所述第一混合液进行糖化处理得到第二混合液：将第一混合液温度维持在55-65℃之间，充分搅拌使其混合均匀，维持60min后以碘-碘化钾溶液测试是否糖化完全，糖化完全后加热麦芽汁至沸腾，保持沸腾状态10min得到的混合物以八层医用纱布过滤得到混合液二；

(3)混合液二使用纱布过滤后的滤渣加入与干物质质量比1:1的60℃饮用水，充分混匀维持10min，再次过滤收集滤液，重复操作一次，将所有的滤液收集混匀得到混合液三；将混合液二与混合液三混匀，调整白利糖度至10，得到混合液四；

(4)第四混合液经过高温灭菌除去大部分沉淀，接入酵母一次厌氧发酵得到原始啤酒粗液，向啤酒粗液中加入益生菌二次发酵得到益生菌啤酒粗液；

(5)向得到的益生菌啤酒粗液中加入稀释灭菌处理后的啤酒花提取物，啤酒花异构物终浓度2‰；

(6)嘌呤含量测定，采用HPLC检测游离嘌呤和总嘌呤含量。