[发明专利]益生菌GR-5及其在生产低嘌呤啤酒中的应用

说明书

本发明提供了一种益生菌菌株及其参与发酵的低嘌呤啤酒的生产方法，其特征在于：(1)自甘肃当地发酵浆水中分离菌株；(2)备选菌嘌呤类物质降解能力测定；(3)备选菌啤酒发酵能力检定；(4)菌株鉴定及其性质检测；(5)低嘌呤益生菌啤酒的制备与改良。通过此方法产出的啤酒在保留了啤酒风味的同时具有独特口味，其嘌呤含量较市售啤酒更低并含有丰富的可降解嘌呤类物质的乳酸片球菌GR‑5，降低了啤酒饮用的高嘌呤风险。

技术领域

本发明涉及益生菌及啤酒制备技术领域，更具体的说是一种益生菌及其参与生产低嘌呤啤酒中的应用。

背景技术

现今社会的迅速发展使得人们的生活水平不断提高，长期摄入的营养物质过多时便可能会造成各类代谢疾病，例如高血压、脂肪肝、肥胖等“富贵病”。作为人体重要的代谢物之一，嘌呤是机体的正常组成部分，但其终产物尿酸的蓄积可能会导致痛风，高嘌呤食物的持续摄入会影响嘌呤代谢，极大提升痛风风险。啤酒是一种公认的高嘌呤饮品，也是公众普遍饮用的低酒精饮料之一，低嘌呤啤酒因此是市场与消费者的共同需求。

啤酒是以大麦芽、啤酒花、水为主要原料，利用酵母进行发酵产出的低酒精度饮料，营养丰富素有“液体面包”之称，其独特风味来自于麦芽与啤酒花，具体的发酵菌株与发酵工艺对其也有很大影响。啤酒本身的相对嘌呤含量并不高，但日常作为饮品的持续大量饮用及其含有的酒精都会对人体的嘌呤代谢产生影响，终产物尿酸的积蓄便可能引发临床症状——痛风。

益生菌是通过定殖在人体内，改变宿主某一部位菌群组成的一类对宿主有益的活性微生物。酸奶、酱油、醋等传统发酵食物含有广量的微生物群，由这类天然发酵产物中提取得到的益生菌则兼具益生效果及安全。，益生菌在肠道内的定植可以构建起益生屏障保护肠道，还可以通过自身代谢改善肠道环境，降低人体氧化压力并在一定程度上抑制有害菌的增殖。随着精酿啤酒行业的不断发展，啤酒的种类日益繁多，在生活中已经可以购买到含有活酵母的鲜(生)啤酒，其独特的风味与鲜爽的口感颇受人青睐。除酵母外，部分乳酸菌也可以在啤酒发酵液中正常生长，这也为以啤酒作为载体输送益生菌提供了现实基础，通过可控有限度的生物酸化，在不显著影响啤酒原始风味的同时引入益生菌，可以在饮用时达到补充益生菌的目的。

本发明所产出的富含GR-5的新型啤酒中的嘌呤类物质含量与市售啤酒相比更低，摄入人体后啤酒其所含的丰富益生菌可辅助降解食源性嘌呤，在满足人们对啤酒需求的同时达到益生效果。

发明内容

承接上文，本发明目的在于提供一种低嘌呤益生菌啤酒的制作方法，旨在解决现有市售啤酒嘌呤含量高口味同质化的问题。通过在啤酒的传统制作工艺中加入益生菌辅助发酵的工序，在得到低嘌呤益生菌啤酒的同时保留啤酒特征风味，满足消费者对啤酒和健康的双重需求。

为实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

1.一种益生菌菌株，所述益生菌菌株是乳酸片球菌GR-5(Pediococcusacidilactici)，该菌株于2022年9月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号为：CGMCC No.25729。

2.一种能高效降解嘌呤类物质的益生菌分离方法，包括如下步骤：

(1)对甘肃浆水中微生物的分离，选择琴姨牌新鲜浆水梯度稀释后均匀涂布于MRS培养基，得到的单菌落挑出接种至MRS液体培养基扩培。

(2)菌株革兰氏染色鉴定，上述备选单菌使用结晶紫初染后水洗，加碘液媒染后水洗使用95％乙醇脱色，加番红液复染水洗干燥后使用油镜观察形态，筛去阴性菌株及酵母菌。

(3)菌株体外纯嘌呤化合物降解能力测定，采用HPLC测定处理单位时间后次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟嘌呤、腺嘌呤含量评估降解效果；

(4)菌株的鉴定，采用16S rRNA基因测序来鉴定分离株的系统发育特征。使用扫描电子显微镜测定菌株GR-5的形态特征。