[发明专利]一种梓醇磁性表面分子印迹聚合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种梓醇磁性表面分子印迹聚合物及其制备方法和应用，所述的梓醇磁性表面分子印迹聚合物采用磁性载体，有着优异的磁性能，对于梓醇具有特异性吸附能力，吸附量达43.36μg/mg，可快速分离梓醇，具有成本低、特异性强、化学稳定性、物理稳健性和可循环使用等优势。本发明将所述的一种梓醇磁性表面分子印迹聚合物应用于梓醇的提取或检测中，提高了样品中梓醇的提取率和检测准确率，消除其他成分对梓醇测定的干扰和影响，且灵敏度高、富集效果好、重复使用性好、回收率高，回收率为99.95％‑104％。

技术领域

本发明涉及一种磁性表面分子印迹聚合物，特别涉及一种梓醇磁性表面分子印迹聚合物及其制备方法和在复杂样品中梓醇富集、检测的应用。

背景技术

地黄为玄参科植物地黄(RehmanniaglutinosaLibosch.)的块根，为中医常用的补益中药之一。地黄的化学成分以环烯醚萜苷类为主，其中梓醇(Catalpol，CAT)是发挥地黄药理作用的主要成分。梓醇具有降血糖、利尿、抗肿瘤、抗衰老和抗炎等生物活性和药理作用，具有重要的利用价值和应用前景。但由于梓醇结构复杂、不稳定，极性大且和其他环烯醚萜苷类化合物相似，存在基质内成分的干扰，因此导致分离、检测较为困难。目前地黄中梓醇的检测方法有反相高效液相色谱(RP-HPLC)、高效液相色谱(HPLC)方法、液质联用(HPLC-UV-MS)法、HPLC-DAD-ELSD串联法等。上述方法一般采用固相萃取(Solid-phaseExtraction，SPE)作为样品预处理技术，以便在定量分析之前清理基质复杂度。但在复杂样品和痕量的梓醇检测时，由于传统SPE吸附剂耗时长且微粒表面积较小，导致吸附能力、富集效率和纯度较低，严重限制了梓醇的富集和检测。因此，开发一种具有选择性、快速、灵敏的样品前处理方法对梓醇的富集、检测具有重要意义。

分子印迹聚合物(Molecularly imprinted polymers，MIPs)是通过目标化合物(模板)与功能单体在溶液中络合，通过共价键或非共价键与过量的交联剂聚合形成高度交联的聚合物网络。但目前并没有关于梓醇的分子印迹聚合物的研究和应用，因此，提供一种高提取率和检测准确率的梓醇分子印迹聚合物是一个需要解决的技术问题。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种梓醇磁性表面分子印迹聚合物及其制备方法和应用。

本发明提供的一种梓醇磁性表面分子印迹聚合物，由以下方法制得：

(1)将梓醇(CAT)和功能单体甲基丙烯酰胺(AM)溶解于二甲基亚砜(DMSO)，室温下搅拌后，得到混合液；梓醇和甲基丙烯酰胺的摩尔比为1：5；

(2)将1-10g Fe₃O₄@SiO₂加入步骤(1)的混合液中，超声处理后，得到预聚合液；

(3)将交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)和10-200mg引发剂偶氮二异丁氰(AIBN)加入到步骤(2)的预聚合液混合均匀后，在氮气保护下水浴加热65-70℃，搅拌12-24h，得到聚合液；

(4)反应完成后，通过外磁场分离聚合液，并用甲醇:乙酸洗脱液、纯水洗涤去除模板分子梓醇，直至梓醇不能被HPLC检测到为止；

(5)洗涤后溶液真空干燥，得到梓醇磁性表面分子印迹聚合物(Fe₃O₄@SiO₂@MMIPs)。

进一步的，梓醇、甲基丙烯酰胺、二甲基丙烯酸乙二醇酯和二甲基亚砜的摩尔比为1：5：5：90。

作为优选，步骤(2)中Fe₃O₄@SiO₂的制备方法如下：

a)Fe₃O₄纳米颗粒的合成