[发明专利]一种快速无损检测细胞中麦角硫因的方法在审
申请号: | 202310057609.1 | 申请日: | 2023-01-17 |
公开(公告)号: | CN115950874A | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
发明(设计)人: | 付钰;王琳淇;卢维来;仇昊宁;谢语嫣 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | G01N21/65 | 分类号: | G01N21/65 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 吴爱琴 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 无损 检测 细胞 麦角 方法 | ||
1.一种快速无损检测细胞中麦角硫因的方法,为基于拉曼光谱快速检测细胞内麦角硫因。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述快速无损检测细胞中麦角硫因的方法,包括如下步骤:
获取待测活体细胞液,洗涤,调整菌悬液浓度,将所得菌悬液加入至样品检测池,利用显微镜找到溶液中的细胞,用激光照射细胞,并获得该细胞的拉曼光谱,若细胞的拉曼光谱存在1210cm-1和1507cm-1的标识峰,则判定待测活体细胞中含有麦角硫因,反之,则判定待测活体细胞中不含麦角硫因。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:若细胞的拉曼光谱中1210cm-1和1507cm-1的拉曼标识峰强度高,则判定待测活体细胞中的麦角硫因含量较高。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于:细胞的拉曼光谱中1210cm-1和1507cm-1的拉曼标识峰受仪器设备的分辨率限制,其标识峰可有1-2cm-1的偏移。
5.根据权利要求2-4中任一项所述的方法,其特征在于:所述激光照射的细胞数目为激光照射范围内的单个细胞或多个细胞。
6.根据权利要求2-5中任一项所述的方法,其特征在于:所述洗涤为对获取的待测活体细胞液中的细胞用氯化钠溶液或细胞等渗透压溶液进行洗涤,所述洗涤进行多次,具体为2-3次;
调整菌悬液浓度至104-107CFU/mL。
7.根据权利要求2-6中任一项所述的方法,其特征在于:所述细胞拉曼光谱检测所用拉曼光谱系统为正置或倒置显微拉曼光谱系统,其中,拉曼光谱系统的激发波长为532nm、633nm和785nm波长中的任何一种或组合;
所述细胞拉曼光谱检测时,总积分时间为3秒以上。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:采用785nm连续激光器作为激发细胞拉曼散射的光源,总积分时间20秒以上。
9.根据权利要求2-8中任一项所述的方法,其特征在于:所述方法还包括对所得拉曼光谱数据进行背景去除、光滑处理、基线校准和归一化处理。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述光滑处理的方法采用卷积平滑方法、移动平均方法、高斯滤波、双边滤波或均值滤波;
所述基线校准方法采用多项式拟合法、BEADS算法、小波算法、经验模态分解;
所述归一化方法采用最小-最大值方法、面积归一化、向量归一化。
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